Микробиологическая     диагностика
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Проводится микроскопия мазка (из биопта-тов крови, ликвора, пунктатов лимфоузлов, плодных оболочек и др.), окрашенного по Романовскому—Гимзе или по Райту. Реже применяется биологический метод: мыши по­гибают через 7—10 дней после парентераль­ного введения им инфицированного матери­ала (крови, ликвора и др.) больных людей. Возможно культивирование токсоплазм на клетках HeLa, на куриных эмбрионах.

Основным в диагностике токсоплазмоза является серологический метод: выявление IgM-антител свидетельствует о ранних сроках заболевания. IgG-антитела достигают макси­мума на 4—8-й неделе болезни. Применяются РИФ, РИГА, PC К, а также реакция Себина— Фельдмана, или красящий тест (при этом методе возбудитель, в зависимости от свойств антител исследуемой сыворотки крови, по-разному окрашивается метиленовым си­ним). Используют также аллергический ме­тод — внутрикожную пробу с токсоплазми-ном, которая положительна с 4-й недели за­болевания и далее в течение многих лет.

Лечение. Наиболее эффективно примене­ние комбинации пириметамина с сульфани­ламидами. При беременности рекомендуется


вместо пириметамина применять спирами-цин, который не проходит через плаценту.

Профилактика. Осуществляется неспецифи­ческая профилактика токсоплазмоза, включа­ющая гигиенические требования, в частности мытье рук перед едой; необходима тщательная термическая обработка мяса. Следует избегать общения с беспризорными кошками.

19.3.3. Саркоцисты (род Sarcocystis )

Саркоцистоз (син. саркоспоридиоз) — бо­лезнь (инвазия), вызванная простейшими рода Sarcocystis (от греч. sarc — мясо), со-провождаюшаяся нарушениями со стороны желудочно-кишечного тракта.

Таксономия. Саркоцисты ( Sarcocystis hominis и Sarcocystis suihominis) близки к токсоплазмам: от­носятся к типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Eucoccidiida (собственно кокцидиям).

Характеристика возбудителей. В ворсинках сли­зистой оболочки тонкой кишки человека происхо­дит половое размножение паразита (гаметогония); в результате копуляции гамет образуются ооцисты, в которых затем образуются спороцисты (содержащие зрелые спорозоиты), выделяющиеся с калом.

Спороцисты имеют овальную форму (размер 10— 16 мкм), содержат по 4 зрелых спорозоита. После заглатывания животными спороцист из них освобож­даются спорозоиты, которые из кишечника проника­ют гематогенно в мышцы. В мышцах бесполым путем (шизогония, или мерогония) образуются саркоцисты. Саркоцисты — удлиненные до 5 см образования, покрытые тонкой оболочкой, содержащие многочис­ленные мерозоиты с заостренным передним концом. Из саркоцист, попавших в кишечник человека, осво­бождаются мерозоиты, которые внедряются в эпи­телиальные клетки, повторяя вышеописанный цикл полового размножения.

Эпидемиология. Саркоцисты (прежнее назва­ние — саркоспоридии) широко распространены, имеют основного хозяина — человека и промежу­точных — крупный рогатый скот ( S. hominis) и сви­ньи ( S. suihominis). Заражение человека происходит алиментарным путем при употреблении термически недостаточно обработанных говядины или свинины, содержащих саркоцисты.

Клиника. Часто инфекция протекает бессимптомно или неспецифично. Различают: кишечный саркоцис-


тоз с развитием диспепсических расстройств; мышеч­ный саркоцистоз, протекающий бессимптомно или в виде миозитов, появления сыпи.

Микробиологическая диагностика. При микроско­пическом методе изучают мазки из свежевыделенных фекалий, окрашенные раствором Люголя: споро-цисты выявляются через 9 суток после заражения. Возможно и гистологическое изучение биоптатов из очагов поражения.

Лечение. Обычно симптоматическое; при остром течении — фуразолидоном.

Профилактика. Профилактические мероприятия сходны с подходами к профилактике токсоплазмоза.

19.3.4. Изоспоры (род Isospora )

Изоспороз — болезнь (инвазия), вызванная кокцидиями (от лат. coccus — круглый) рода Isospora ; поражаются слизистые оболочки тон­кой кишки, развивается диарейный синдром.

Таксономия. Возбудители изоспороза челове­ка — Isospora belli и Isospora natalensis относятся к типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Eucoccidiida (собственно кокцидии).

Характеристика возбудителей. Развитие в организ­ме человека включает бесполое (мерогония), поло­вое (гаметогенез) размножение и образование ооцист. Ооцисты выделяются с испражнениями инфицирован­ного человека и месяцами сохраняются в окружающей среде. Попав в кишечник, ооцисты освобождают споро-зоиты серповидной формы. Спорозоиты проникают в эпителии тонкой кишки и превращаются в трофозоиты. Трофозоиты размножаются бесполым путем, образуя многочисленные мерозоиты. Мерозоиты проникают в другие эпителиальные клетки, продолжая цикл разви­тия. В отдельных клетках образуются гамонты (половые клетки). После оплодотворения женской клетки фор­мируются незрелые ооцисты, выделяемые с фекалиями. Они окружены двухконтурной оболочкой, имеют оваль­ную форму (размер 20—35 мкм). Созревание ооцист за­вершается через 2-3 дня: в ооцисте образуются 2 споро-цисты, содержащие по 4 серповидных спорозоита

Эпидемиология. Возбудители наиболее распростра­нены в странах тропического и субтропического кли­мата. Заражение происходит от человека человеку per os с загрязненной водой и пищей.

Клиника. Инкубационный период 6—10 дней. Заболевание типа колита, энтероколита, сопровож­дается болями в животе и поносом. Возможно разви- тие воспаления и эрозий слизистой оболочки тонкой кишки. Часто инфекция протекает бессимптомно.

Микробиологическая диагностика. При микроско­пии мазка из испражнений обнаруживают ооцис­ты, которые выявляются после 10-го дня болезни. Проводится также дифференциация в случае обна­ружения случайных, транзиторных ооцист животных и рыб, непатогенных для человека. Учитываются размеры ооцист, количество спороцист, спорозоитов и др. В неокрашенном мазке ооцисты овальные, прозрачные, с оболочкой. По Цилю—Нельсену они красятся в розовый цвет.

Лечение. Применяют сульфаниламидные препара­ты, пириметамин, бактрим, фансидар и др.

Профилактика. Особое внимание уделяется соблю­дению санитарно-гигиенических требований, общих для других кишечных инфекций.

19.3.5. Криптоспоридии (род Cryptosporidium )

Криптоспоридиоз — болезнь (инвазия), вы­званная простейшими рода Cryptosporidium , сопровождающаяся явлениями гастроэнте­рита и диареи.

Таксономия. Криптоспоридии ( Cryptosporidium parvum и др.) относятся к типу Apicomplexa , классу Sporozoa , отряду Eucoccidiida .

Характеристика возбудителя. Криптоспоридии встречаются у млекопитающих, птиц, рептилий и рыб. Паразит размножается половым (гамето-гония) и бесполым (шизогония) путями в желу­дочно-кишечном тракте животных. В кишечнике хозяина образуются ооцисты (4—6 мкм в диаметре), которые вьщеляются с фекалиями. После заглатыва­ния ооцист в тонкой кишке из них высвобождаются 4 червеобразных спорозоита, которые контактируют с эпителиоцитами, окружаясь мембранами клеток. Затем формируются внутриклеточные трофозоиты. Трофозоиты размножаются путем множественного деления (шизогония, или мерогония) с образова­нием 8 дочерних клеток (мерозоиты I типа). Затем цикл шизогонии повторяется вплоть до выхода из эпителиальной клетки 4 дочерних клеток (меро­зоиты II типа), которые превращаются в половые формы. После оплодотворения образуется зигота, превращающаяся в ооцисту (рис. 19.8).

Ооцисты имеют толстую клеточную стенку; выживают в окружающей среде и способны


 

заразить нового хозяина. Некоторые ооцисты (20 %) имеют тонкую клеточную стенку: из них в просвете кишечника высвобождаются спорозоиты, дающие начало новому циклу развития в том же хозяине (аутоинвазия).

Резистентность. Ооцисты сохраняются в ок­ружающей среде несколько месяцев и резис­тентны к дезинфицирующим веществам, хло­рированию воды, озону. Они чувствительны к 10% формалину и 5% раствору аммиака.

Эпидемиология. Источником инфекции слу­жат люди или животные (кошки, собаки, ягнята, поросята, телята). Криптоспоридии передаются фекально-оральным механизмом, при контакте, иногда аэрогенным механизмом. Заболевание развивается чаще на фоне иммунодефицита (оп­портунистическая инфекция). Человек и живот­ные заглатывают ооцисты с пищей или водой.


Криптоспоридиоз относится к группе диарей путешественников, так как туристы могут пора­жаться криптоспоридиями, находясь вне дома. Первый случай криптоспоридиоза у человека был описан в 1976 г. у американской девочки с симптомами рвоты и диареи. Это одна из основ­ных причин диарей в детских учреждениях

Клиника. Инкубационный период 2-7 дней. Клиника разнообразна: от острой диареи с тошнотой и болями в животе до хронических поражений ЖКТ. У гомосексуалистов при из­вращенных контактах возбудитель попадает не только в пищеварительный тракт, но и в дыхательную систему партнера.

Микробиологическаядиагностика. Применяют микроскопический метод для выявления ооцист в фекалиях, иногда — в мокроте, биоптатах ки­шечника и др. Мазки красят в модификации по


Цилю—Нельсену (кислотоустойчивые ооцисты красного цвета, а другая микрофлора — синего или зеленого цвета), Романовскому—Гимзе.

Лечение. При криптоспоридиозе прово­дят симптоматическое лечение. Эффективно применение спирамицина.

Профилактика. Проводят общегигиеничес­кие мероприятия. Целесообразна также об­работка против ооцист в животноводческих фермах, больницах и детских учреждениях.

19.3.6. Циклоспоры (род Cyclospora )

Циклоспоридиоз, или циклоспороз, — бо­лезнь (инвазия), вызванная простейшими Cyclospora cayetanensis . сопровождающая­ся диареей. Эти кокцидии таксономичес-ки связаны с изоспорами (род Isospora ) и Cryptosporidium parvum .

Паразит поражает верхние отделы тонкой кишки, обнаруживаясь в вакуолях цитоплазмы эпителиоци-


тов, вызывая воспаление, атрофию ворсинок и гипер­плазию крипт. Патогенность мало изучена. Ооцисты циклоспор имеют сферическую форму, размером 8—10 мкм, что больше ооцист Cryptosporidium parvum (4—6 мкм) и меньше ооцист изоспор (20—35 мкм). Ооцисты циклоспор окружены оболочкой и содер­жат две спороцисты, каждая их которых имеет два спорозоита.

Эпидемиология. Циклоспоры широко распростра­нены, инфицируя рептилий, птиц и млекопитаю­щих. Как и криптоспоридии, они резистентны к хлорированию воды. Инфицирование происходит фекально-оральным механизмом.

Клиника. Заболевание протекает в виде анорек-сии и диареи. Более длительно и тяжело заболе­вание протекает у людей с иммунодефицитами (ВИЧ-инфекция).

Микробиологическая диагностика. Диагноз основан на микроскопическом определении ооцист в фекалиях. Изучают нативные мазки или обработанные раствором Люголя. При модифицированной окраске мазка по Цилю—Нельсену ооцисты округлой формы окрашива­ются в красный цвет. В люминесцентном микроскопе циклоспоры аутофлюоресцируют синим цветом.

Лечение. Возможно триметоприм-сульфаметоксазо лом, метронидазолом.

Профилактика. Проводят общегигиенические ме­роприятия.

19.3.7. Бабезии (род Babesia )

Бабезиоз (пироплазмоз) — маляриеподоб-

ная болезнь (инвазия) с ознобом, лихорад­кой и гемолитической анемией, вызванная простейшими рода Babesia .

Таксономия. Возбудители бабезио-за (В. divergens , B . microti и др.) относятся к типу Apicomplexa , классу Sporozoa , отряду Pyroplasmida .

Характеристика возбудителей. Бабезии яв­ляются внутриклеточными паразитами эрит­роцитов. Внешне похожи на юные кольце­видные формы плазмодий (рис. 19.9). Чаще размножаются парами (несинхронное почко­вание) по периферии эритроцита. Имеют ок­руглую, грушевидную форму, размер 2—3 мкм; иногда принимают кольцевидную форму с двумя ядрами, напоминая Plasmodium falci ­ parum .


Эпидемиология. Бабезии — паразиты до­машних и диких животных, передаются ик-содовыми и аргасовыми клещами.

Патогенез. Паразиты могут поражать до 10— 15 % эритроцитов с развитием гемоглобину-рии и летального исхода.

Клиника. Заболевание протекает бессимп­томно. Наиболее тяжело развивается заболе­вание у людей с недостаточностью селезенки, спленэктомированных людей. Первый случай болезни у человека был описан в Югославии в 1957 г. У больных появляются озноб, лихорад­ка, головная и мышечные боли.

Микробиологическая диагностика. В диа­гностике бабезиоза используют микроскопи­ческий метод изучения мазков крови, окра­шенных по Романовскому—Гимзе: цитоплаз­ма бабезий окрашивается в голубой цвет, а ядро — в красный. Характерно расположение паразита в эритроците в виде тетрад из трофо-зоитов. В серологическом методе (непрямой метод РИФ, ИФА) антитела в диагностичес­ких титрах выявляются через 3—8 недель от начала болезни.

Лечение. Применяют комбинацию хинина с клиндамицином.


Профилактика. В профилактику входят ме­роприятия по борьбе с переносчиками — кле­щами и защите от них.









Ресничные

Представители ресничных (тип Ciliophora ) имеют реснички — органоиды движения, пок­рывающие клетку. Они имеют клеточный рот (цитостом), два ядра (макро- и микронукле­ус). Для человека патогенен Balantidium coli .

19.4.1. Балантидии (род Balantidium )

Балантидиаз (дизентерия инфузорная) —

болезнь (инвазия), характеризующаяся об­щей интоксикацией и язвенным поражени­ем толстой кишки.

Таксономия. Возбудитель балантидиаза — Balantidium coli , относятся к типу Ciliophora , классу Ciliata ( Kinetofragminophorea ). Открыт в 1856 г. шведским врачом П. Мальмстеном.

Характеристика возбудителя. Паразит рас­пространен широко, являясь обитателем ки­шечника свиней, обезьян и грызунов, однако


редко вызывает заболевание. Он имеет вегета­тивную и цистную стадии развития.

В вегетативной стадии клетка парази­та (трофозоит) овальная, крупная (30/100x х 30/150 мкм), с ресничками (рис 19.10); на переднем конце имеется щелевидное отверс­тие — перистом с ротовым отверстием — ци-тостомом. Задний конец имеет анальную по­ру — цитопрок. Клетка содержит макронукле­ус, микронуклеус и 2 сократительные вакуоли. Размножение — поперечным делением. Клетка может заглатывать микробы и другие клетки, в том числе форменные элементы крови.

Цисты — округлые, с толстой оболочкой; диа­метром 40—60 мкм, одноядерные. Они попадают в окружающую среду с фекалиями и длительно в ней сохраняются. Заражение цистами проис­ходит фекально-оральным механизмом через рот с загрязненной водой и пищей. Патогенез сходен с таковым при амебиазе. Развиваются колит, язвы и абсцессы в толстой кишке.

Микробиологическаядиагностика. Проводится микроскопия мазков из свежевыделенных фе­калий: каплю фекалий помещают в изотони­ческий раствор хлорида натрия и исследуют препарат «раздавленная капля» под малым уве­личением микроскопа, наблюдая активное дви­жение крупных балантидий.

Лечение. Применяют метронидазол и дру­гие препараты, назначаемые при амебиазе.

Профилактика. Соблюдение правил личной ги­гиены, особенно для работников свиноводства.

19.5. Микроспоридии (тип Microspora )

Микроспоридии — возбудители мик-роспоридиоза; вызывают диарею, гнойно-воспалительные заболевания у иммунодефицитных лиц. Вызывают мик-роспоридиоз в виде хронической диареи, гнойно-воспалительных заболеваний, ке­ратита, диссеминированной инфекции у иммунодефицитных лиц (табл. 19.2). Микроспоридии широко распространены среди животных, которые выделяют резис­тентные споры с калом и мочой.

Таксономия. Микроспоридии принадлежат к типу Microspore , отряду Microsporidia . Описано


143 рода и более 1200 видов микроспоридий. Патогенные для человека виды представле­ны 8 родами { Enterocytozoon , Encephalitozoon , Nosema , Pleistophora , Vittaforma , Microspoidium , Brachiola , Trachipleistophora ) и неклассифици­рованными микроспоридиями.

Характеристика возбудителей. Микроспори­дии — мелкие (0,5—2,5 мкм) округлые прими­тивные простейшие. Являются облигатными внутриклеточными паразитами. Обычно ин­фицирование происходит в результате загла­тывания спор, которые проходят в двенадца­типерстную кишку. Спора содержит спороп-лазму с ядром и выталкивающим аппаратом, который состоит из трубчатой нити с ядерным диском. При контакте с клеткой нить выбра­сывается и спороплазма попадает внутрь клет­ки. Внутриклеточное размножение паразита происходит путем повторных делений надвое (мерогония) и спорообразованием (спорого­ния). Паразиты размножаются при прямом контакте с цитоплазмой клетки хозяина (на­пример, Е. bieneusi ) или внутри паразитофор-мной вакуоли (например, Е. intestinalis ). В обоих случаях в результате спорогонии созре­вают споры. Вокруг споры формируется плот­ная стенка, обеспечивающая устойчивость к окружающей среде. Споры, заполнившие клетки, разрушают клетку и выходят из нее. Созревшие споры вновь инфицируют новые клетки, повторяя цикл развития. Развивается локальное воспаление. После спорогонии зрелые споры (грамположительные, кисло­тоустойчивые), содержащие спороплазму, вы­деляются в окружающую среду. Споры имеют размеры: от 0,8 до 1,4 мкм у Е. bieneusi и от 1,5 до 4 мкм у Enterocytozoon spp .

Эпидемиология. Микроспоридии широко распространены среди беспозвоночных и поз­воночных животных, выделяясь в виде спор с калом и мочой. Возбудители передаются фекально-оральным механизмом. Возможно инфицирование через респираторный тракт и контактным путем (при конъюнктивитах).

Клиника. Микроспоридии Enterocytozoon bi ­ eneusi и Enterocytozoon intestinalis (ранее Septata intestinalis ) вызывают хроническую диарею у больных СПИДом и гнойно-воспалительные процессы (синусит, бронхит, пневмонию, нефрит, уретрит, цистит и др.) у людей с


Таблица 19.2. Поражения, вызываемые микросиоридиями

Виды микроспоридий Клинические проявления
Enterocytozoon bieneusi Диарея, бескаменный холецистит
Enterocytozoon intestinalis (син. Septata intestinalis) Диарея, диссеминированная инфекция глаз, урогенитального и респираторного трактов
Enterocytozoon hellem, Enterocytozoon Кератоконъюнктивит, инфекция респираторного и урогени-
cuniculi тального трактов, диссеминированная инфекция
Vittaforma corneae (син. Nosema corneum), Nosema spp. (N. connori, N. ocularom) Инфекция глаз

иммунодефицитами. Encephalitozoon hellem , Nosema ocularum и Vittaforma corneae (ранее Nosema corneum ) вызывают кератит, диссеми-нированные инфекции. Диссеминированные инфекции, вызванные Encephalitozoon hellem , Nosema connori , Encephalitozoon cuniculi и Pleistophora species , а также миозит, вызванный Nosema-подобными и другими микроспори­диями, описаны у иммунодефицитных лиц.

Микробиологическая диагностика. Проводится путем микроскопического изучения биопта-та кишечника, мочевого пузыря или мазка из цереброспинальной жидкости, бронхоальвео-лярной жидкости, осадка мочи. Споры (диа­метр 1—2 мкм) выявляют при окраске по Граму (грамположительные) или по Гудпасчеру — ок­раска карболфуксином с последующим обесц­вечиванием 37% формальдегидом и докраской пикриновой кислотой.

Лечение. Проводят метронидазолом.

Профилактика. Неспецифическая, сходная с мероприятиями при криптоспоридиозе.


19.6. Бластоцисты (род Blastocystis )

Бластоцисты ( Blastocystis hominis ) харак­теризуются бессимптомным носительством или вызывают бластоцистоз. Их обнаружи­вают в фекалиях при диарее.

Бластоцисты относят к простейшим (ранее предполагали, что они являются дрожжами). Бластоцисты близки к амебам, могут образо­вывать псевдоподии; как и все простейшие, не имеют клеточной стенки. Питаются бак­териями. Размножаются бинарным делением или споруляцией.

Патогенность не изучена. Бластоцисты от­личаются полиморфизмом. В фекалиях име­ют сферическую форму, размер 5—30 мкм. Цитоплазма и ядро клетки паразита оттесне­ны на периферию вакуолеподобным телом.

Диагностика. Основана на микроскопии мазка из фекалий.

Лечение. Проводят метронидазолом.








Дата: 2019-02-19, просмотров: 233.