Основные формы бактерий. Морфология, ультраструктура, химический состав бактериальной клетки. Основные отличия прокариотов от эукариотов. Протопласты, сферопласты, L -формы бактерий
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой
Органелла

Основные функции

Особенности строения
 Клеточная стенка

1.Постоянная форма клетки.

2.Защитная функция.

3.Регуляция роста и деления.

4.Коммуникация с внешней средой.

5.Рецепторная функция.

6.Антигенные свойства

Состоит из двух слов – наружного (пластинчатого) и внутреннего (ригидного). Основу клеточной стенки составляет пептидогликан. Пептидогликан имеет остов, набор пептидных цепочек. Пептидогликан может разрушаться под действие бета-лактамных антибиотиков.
Цитоплазматическая мембрана

1.Постоянная форма клетки.

2.Защитная функция.

3.Регуляция роста и деления.

4.Коммуникация с внешней средой.

5.Рецепторная функция.

6.Поддержание осмотического давления.

7.Активный транспорт веществ.

8.Синтез компонентов клеточной стенки.

10.Участие в образовании мезосом.

40% фосфолипидов (2 слоя) – асимметричны.
Цитоплазма

Генетический материал.

 

Синтез белка.

Энергетический обмен.

Питательные вещества, продукты обмена веществ.

Сложная коллоидная система. Состоит из белков, РНК, включений и различных гранул, в т.ч. рибосом.
Капсулы

1. Защитная функция

2.Запас питательных веществ.

3.Антигенные свойства.

4.Фактор патогенности.

5.Задержка фагоцитарной активности макрофагов.

Слизистая структура, связанная со стенкой.
Жгутики  

Движение

Связаны с мембраной. Состоят из белка флагеллина. Строение: спиральная ниь, крючок, базальное тельце.
Пили

1. Адгезия

2. Половая функция

Состоят из белка пилина.
Споры 1. Защитная функция.

Покоящиеся клетки с низким уровнем метаболизма и высокой устойчивостью к внешним факторам.

Волютин  

Образуется при избытке пит. веществ в окружающей среде

       

· Особенности клеточной стенки грамположительных бактерий.

Мощная, толстая, несложно организованная клеточная стенка, в составе которой преобладают пептидогликан и тейхоевые кислоты, нет липополисахаридов (ЛПС), часто нет диаминопимелиновой кислоты.

· Особенности клеточной стенки грамотрицательных бактерий.

Клеточная стенка значительно тоньше, чем у грамположительных бактерий, содержит ЛПС, липопротеины, фосфолипиды, диаминопимелиновую кислоту. Устроена более сложно- имеется внешняя мембрана, поэтому клеточная стенка трехслойная.

Некоторые бактерии снабжены жгутиками и ворсинками. Ряд бактерий образуют споры.

Исследование микробов в окрашенном состоянии. Простые и сложные методы окраски бактерий. Описать принцип окраски бактерий по Граму. Перечислить грамположительные и грамотрицательные группы микроорганизмов.

При простых методах мазок окрашивают каким-либо одним красителем, ис­пользуя красители анилинового ряда (основные или кис­лые). Если красящий ион — катион, то краситель обладает основными свойствами, если хромо­фор - анион, то краситель имеет кислые свойства. Кис­лые красители — эритрозин, кислый фуксин, эозин. Ос­новные красители — генциановый фиолетовый, кристал­лический фиолетовый, метиленовый синий, основной фуксин. Преимущественно для окраски микроорганизмов используют основные красители, которые более интенсивно связываются кислыми компонентами клетки. Из сухих красителей, продающихся в виде порошков, готовят на­сыщенные спиртовые растворы, а из них — водно-спирто­вые, которые и служат для окрашивания микробных кле­ток. Микроорганизмы окрашивают, наливая краситель на поверхность мазка на определенное время. Затем мазок промывают водой до тех пор, пока стекающие струи воды не станут бесцветными, высушивают осторожным промоканием фильтровальной бумагой и микроскопируют в иммерсионной системе. Ес­ли мазок правильно окрашен и промыт, то поле зрения совершенно прозрачно, а клетки интенсивно окрашены.

Сложные методы окраски применяют для изуче­ния структуры клетки и дифференциации микроорганиз­мов. Существуют несколько основных окрасок: по Граму, по Цилю-Нельсону (дифференциация кислотоустойчивых бактерий), Бури-Гинсу (выявление капсул), по Ожешко (выявление спор), Нейссеру (выявление зерен волютина).

Окраска по Граму.

Этап Вещество Время
Окраска основным красителем Генцианвиолет 1 минута
Фиксация Раствор Люголя 1 минута
Обработка диффузным веществом 96% этиловый спирт 5-10 секунд
Промывка Вода 5-10 секунд
Окраска дополнительным красителем Водный фуксин 1 минута
Промывка Вода 5-10 секунд

Принцип метода: Основной краситель связывается с пептидогликаном, которого много в клетке грамположительных бактерий. Раствор Люголя, содержащий йод, фиксирует комплекс. После обработки диффузным веществом и водой генцианвиолет, плохо связавшийся в стенке грамотрицательных бактерий, выходит, и они окрашиваются дополнительным красителем.

Окраска капсул по Бурри-Гинсу,

Этап Вещество Время
Негативное контрастирование Чёрная тушь 1 минута
Фиксация Пламя горелки 1 минута
Окраска по Гинсу Водный фуксин 1 минута
Промывка Вода 5-10 секунд

Принцип метода: Тушь окрашивает капсулы, а краситель - цитоплазму.

Окраска кислотоустойчивых бактерий по Циль-Нильсену.

Этап Вещество Время
Окраска основным красителем Карболовый фуксин Циля 3-5 минут при нагревании
Обработка диффузным веществом Раствор серной кислоты 1-2 минуты
Промывка Вода 5-10 секунд
Окраска дополнительным красителем Метиленовый синий 3-5 минут
Промывка Вода 5-10секунд

Принцип метода: Основной краситель изначально окрашивает все микроорганизмы. После обработки кислотой краситель удерживают только кислотоустойчивые бактерии. Кислотонеустойчивые бактерии окрашиваются дополнительным красителем.

Окраска спор по Ожешко.

Этап Вещество Время
Протравливание Раствор соляной кислоты 2-3 минуты при нагревании
Промывка Вода 5-10 секунд
Фиксация Пламя спиртовки 5-10 секунд
Окраска основным красителем Карболовый фуксин Циля 2-3 минуты при нагревании
Обработка диффузным веществом Раствор серной кислоты 1-2 минуты
Промывка Вода 5-10 секунд
Окраска дополнительным красителем Метиленовый синий 1 минута
Промывка Вода 5-10 секунд

Принцип метода: Соляная кислота разрыхляет споры и делает возможным их окраску. Вегетативные формы окрашиваются дополнительным красителем.

Окраска включений волютина по Нейссеру.

Этап Вещество Время
Окраска основным красителем Уксуснокислый метиленовый синий Нейссера 1 минута
Обработка диффузным веществом Вода 5-10 секунд
Окраска дополнительным красителем Везувин 1 минута
Промывка Вода 5-10 секунд

Принцип метода: Волютин связывается с метиленовым синим, образуя нерастворимое вещество. Цитоплазма окрашивается дополнительным красителем в желтый цвет.

Окраска по Романовскому-Гимзе

Мазки, фиксированные в метиловом спирте, окрашивают раствором (1 мл готовой жидкой краски + 2 мл основного буферного раствора + 47 мл дистиллированной воды) в течение 40—120 мин (продолжительность окрашивания подбирают эмпирически). Пользуются фосфатным буфером. Ополаскивают в дистиллированной воде, высушивают и исследуют при иммерсии.

Принцип метода: Бактерии окрашиваются в фиолетово-красный цвет, цитоплазма клеток — в голубой, ядра — в красный

Дата: 2019-02-19, просмотров: 392.