Применение экспериментальных животных в микробиологии
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

 

1. Используют:

1)для обнаружения вируса в ПМ

2)первичного выделения вируса из ПМ

3)накопления вирусной массы

4)поддержания вируса в лабе в активном сост.

5)титровании вируса

6)в качестве тест-объекта в РН

6)получение гипериммунных сывороток.

Использ. жив.: белые мыши, белые крысы, Мор. свинки Кролики

 

 

51. Стафилококки. Морфология, культивирование свойства. Факторы патогенности. Патогенез.
Микробиологическая диагностика. Иммунитет. Биопрепараты.

Патогенные стафилококки - вызывает гнойно-воспалительные процессы различной локализации: местные – фу-рункулы, абсцессы и др.; в отдельных органах – маститы, эндометриты и др.; общее поражение – пиемия и септицемия.

пищевые токсикозы (токсикоинфекции)

 

Классификация:

род: Staphylococcus

виды:

S.aureus - наиболее патогенный

S.epidermidis – наименее патогенный

S.saprophyticus – очень редко вызывает болезни.

 

Восприимчивы все виды животных, включая человека и птиц.

 

АГ : пептидогликан, тейхоевые к-ты, протеин A

 

Патогенез и факторы вирулентности:

проникает в организм через поврежденную кожу и слизистые оболочки;

энтеротоксины – с пищевыми продуктами (мясо, молоко и др.);

образуют и выделяют экзотоксины: гематоксин, лейкоцидин, энтеротоксин, некротоксин;

образуют и выделяют ферменты: коагулазу, фибринолизин, гиалуронидазу, ДНК-азу.

 

Методы диагностики

 

Бактериологический метод:

 

материал для исследования:

раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделение из половых органов при эндометритах, кровь при септицемии;

 

микроскопия:

методы окраски:

простой метод и по Граму;

микрокартина:

шаровидные клетки располагаются беспорядочно, диаметр 0,5-1,5 мкм;

грамположительные;

спор не образуют;

капсулу не образуют.

 

культивирование:

посев на питательные среды:

МПА, МПБ, МПА с 15% хлорида натрия, кровяной МПА.

особенности выделения чистой культуры:

факультативные анаэробы;

оптимальная температура 370C;

срок культивирования 18-20 часов.

 

культуральные свойства:

на МПА – колонии округлые, диаметром 2-5 мм, с ровным краем, могут быть окрашены в золотистый цвет (S.aureus), белый (S. epidermidis), лимонно-желтый (S.saprophyticus).

на жидких средах: на МПБ – равномерное помутнение с выпадением рыхлого хлопьевидного осадка.

 

биохимические свойства (ферментативная активность):

ферментация маннита без газа (в анаэробных условиях);

гемолиз на кровяных средах;

ДНК – азная активность;

 

Рост на элективных средах;

Плазмокоагуляция.

 

Биопроба для определения свойств:

летальных – на кроликах;

дерматонекротических – на кроликах;

токсических – на котятах

Серологическая и аллергическая диагностика:

в ветеринарии не используется

 

Антигенное строение; серотины; фаготипы

 

Патогенные и непатогенные стафилококки могут быть также дифференцированы с помощью реакции адсорбации. С помощью адсорбированных сывороток пиогенные стафилококки были разделены на 7 специфических типов и 8 типов с менее специфическими реакциями. Большое значение имеет метод фаготипажа стафилококков. С помощью специфических стафилококковых фагов стафилококки отнесены к различным фаготипам.

 

Метод фаготипирования позволяет выявить патогенность штаммов стафилококка. Для фагодиагностики стафилококков с помощью специфического фага, применяются фаги, принадлежащие к пяти группам. Основными фагами удается пикетировать до 60 % выделяемых бактерий, процент пикетируемых фагами стафилококков достигает 73,7 %.

 

По степени патогенности и токсичности стафилококки могут быть разделены на 3 группы:

стафилококки первой группы дают значительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана в течение 1 - 2 ч. Стафилококков этой группы выделяют при фурункулезе, гидраденитах, остеомиелитах, флегмонах, сепсисе и при ряде других гнойных заболеваниях. Стафилококки, принадлежащие к первой группе считаются патогенными;

 

стафилококки второй группы вызывают незначительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана. Они считаются условно патогенными. Они встречаются часто на открытых поверхностях кожи, при фолликулитах, иногда на поверхности ран;

 

стафилококки третьей группы не вызывают гемолиза на 5 % кровяном агаре с кровью кролика или барана. Эти стафилококки следует считать сапрофитами, их часто выделяют с поверхности здоровой кожи, а также с различных предметов.

 

Для выделения стафилококков производят посев на чашку Петри с молочно-солевым агаром. Одновременно засевают чашки с 5 % кровяным агаром с кровью кролика или барана. Через 18 - 20 ч инкубации при 37 °С выросшие на чашках колонии микроскопируют, делают мазок и окрашивают по Граму. Колонии стафилококков затем пересевают на пробирки с питательной средой и помещают в термостат при 37 °С. Через 12 - 18 ч роста после микроскопирования мазков из выросшей культуры, окрашенных по Граму, ставят реакцию плазмокоагуляции, а из оставшейся культуры готовят взвесь и вводят кролику внутрикожно. Реакцию учитывают через 24 - 48 ч (появление некроза).

 

52. Стрептококки. Морфология, культивирование, ферментативные свойства. Антигенная
структура. Патогенез. Микробиологическая диагностика.

 

Патогенные стрептококки – возбудители гнойно-воспалительных процессов различной локализации (мыт лошадей, маститы у животных, стрептококковая септицемия птиц, кроликов, стрептококковый полиартрит), а также смешанных и вторичных инфекций (абсцесс, фурункул, нефрит, пиемия, сепсис и др.).

Фекальные стрептококки могут вызвать воспаление кишечника и мочеполовых путей.

Пищевые токсикозы (токсикоинфекции).

Классификация возбудителей:

Сем. Streptococcaceae

Род. Streptococсus, включает 17 серологических групп

Виды.

Str.pyogenes (гнойно-воспалительный процессые)

Str. Ebui (мыт у лошадей)

Str. Agalactiiae (мастит)

Str. Disgaiactiae (стрептококковый полиартрит ягнят)

Str. Sooepidemicus (стрептококковая септицемия птиц)

 

Патогенез и факторы вирулентности:

многие патогенные стрептококки относятся к нормальной микрофлоре кожи и слизистых оболочек и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности;

образуют экзотоксины – гемолизин, лейкоцидин, летальный некротоксин;

продуцируют ферменты – гиалуронидаза, фибринолизин, ДНК-азу, РНК-азу, нейрамидазу и др;

образуют термостабильные эндотоксины.

 

Методы диагностики

Бактериологический метод:

 

материал для исследования:

при жизни – гной, молоко, кровь, кал;

посмертно – пораженные органы.

микроскопия:

методы окраски:

простой метод по Граму;

 

микрокартина:

шаровидные клетки до 1 мкм, располагающиеся в короткие и длинные цепочки;

грамположительные;

спор не образуют;

капсулу не образуют;

неподвижны.

 

культивирование:

посев на питательные среды:

МПА и МПБ, с сывороткой крови, с сахаром, с кровью;

особенности выделения возбудителя:

факультативные анаэробы;

оптимальная температура 37oС;

срок культивирования 18-20 часов;

 

культуральные свойства:

на плотных средах – мелкие, прозрачные с ровным краем колонии;

на жидких средах – незначительное помутнение, крошковидный осадок.

биохимические свойства:

ферментируют углеводы – глюкозу, сахарозу и др. (без газа);

не обладает протеолитическими свойствами;

на кровяном МПА вызывают гемолиз.

биопроба:

заражают подкожно белых мышей, кроликов.

 

Серологические методы:

применяют реакцию преципитации для типизации выделенных культур.

 

орфология стрептококков- это неподвижные шаровидные или овальные кокки диаметром 0,8-1 мкм, образующие цепочки различной длины и положительно окрашиваются по Граму. Часть штаммов образует капсулу. Длина цепочек связана с условиями выращивания. В жидкой питательной среде они длиннее, на плотных средах нередко расположены в виде коротких цепей и пучков. Кокки перед делением могут быть овоидными. Деление происходит перпендикулярно по отношению к цепи. Каждый кокк делится на 2.

 

Биология стрептококков: культуральные свойства. На агаре с кровью стрептококк образует мелкие (1-2 мм в диаметре) полупрозрачные палочки, сероватые или бесцветные, которые хорошо снимаются петлей. Величина зоны гемолиза варьирует у разных штаммов: группа А образует зону гемолиза несколько превышающую диаметр колонии, группа B дают большую зону гемолиза. Стрептококки типа А образуют зеленоватую или зеленовато-коричневую зону гемолиза, мутноватую или прозрачную, варьирующую по величине и интенсивности окраски. В некоторых случая сама колония приобретает зеленоватое окрашивание. В жидких питательных средах для стрептококков характерен придонный часто поднимающийся по стенкам рост. При взбалтывании зернистая или хлопьевидная взвесь. Общепринятые среды для выращивания: мясопептонный агар с добавлением крови кролика или барана, полужидкий агар с сывороткой.

 

Хороший рост и токсинообразование могут быть обеспечены на "комбинированном бульоне" или на средах, содержащих казеиновый гидролизат и дрожжевой экстракт. Гемолитические стрептококки метаболизируют глюкозу с образованием молочной и других кислот, что является фактором, лимитирующим рост микробов в питательной среде. Устойчивость к физическим химическим факторам.

 

Гемолитические стрептококки группы А в течении длительного времени могут сохраняться на предметах, в пыли в высушенном состоянии. Однако эти культуры, сохраняя жизнеспособность, утрачивают вирулентность.

 

Стрептококк группы А высокочувствителен к пенициллину, который оказывает на него бактерицидное действие. Сульфаниламид действует на стрептококк А бактериостатически.

 

Для бактериологического исследования материал, собранный тампоном со слизистой зева и носа, засевают на чашку Петри с кровяным агаром, ставят в термостат на 3-4 ч при 37°С. При наличии стрептококков через сутки на агаре вырастают характерные палочки. Для микроскопического исследования изолированную колонию пересевают в жидкую питательную среду (мясопептонный бульон с сывороткой) и через 24 ч выращивания в термостате подвергают исследованию. Мазки окрашивают по Граму или метиленовым синим по Леффлеру. Затем изучают биохимические свойства культур и определяют тип стрептококка с помощью реакции агглютинации на стекле и реакции преципитации с типовыми сыворотками. Из серологических реакций применяют реакцию связывания комплемента (РСК) с сывороткой иммунизированного кролика.

 

53. Возбудитель мастита. Морфология, культивирование, биохимические свойства, факторы
патогенности. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Иммунитет. Биопрепараты
.

Мастит- Str. Agalactiae

В лабораторию – молоко, гной из абсцессов, гнойные выделения из пораженных частей вымени.

Гр +, сп —, кп —, двж—.

Мелкий кок, цепи до 100 шт, извитые.

Аэроб

кров. МПА - b -выявление скрытой гемолитич акт-ти

МПБ, МПА с глюкозой

Биохим ;

желатина –

молоко –

лактоза +

 глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, салицин до к-ты, камп-метод на кровяном агаре с β-гемолитическим стафилакокком, рядом доп. Гемолиз стрептококка. Среда Гиса с цветным рядом.

Биопроба – морск свинку внутрибрюшинно 0,3-0,5мл, гибель через 24-48 часов.

Препп:Мастицит, мастит-форте, синтомициновая и ихтиоловая мази, мазь Вишневского, бактериофаги.

Имм: Непрод, слаб, нестерильный

Факт пат: гемолизин, лейкоцидин, летальный, некротоксин, ферменты, тстаб эндотокс

Леч: А/б, с/а

 

54. Возбудитель мыта Морфология, культивирование, биохимические свойства. Восприимчи­
вость сельскохозяйственных животных. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Им­
мунитет. Биопрепараты.

 

Мыт лошадей (Adenitis equorum) — остро протекающая болезнь жеребят, реже лошадей (если они ранее не болели мытом); изредка наблюдают заболевания ослов и мулов.

6 мес - 5 лет цельнокопытные

кошки, мыши

 

 

Возбудитель (Str. equi) серогруппы С окрашивается всеми анилиновыми красками, грамположителен, спор не образует, неподвижен. В мазках из гноя (из абсцессов).лимфатических узлов больных животных заметны в виде длинных и коротких цепочек, состоящих из десятков кокков. В мазках из носового истечения мытный стрептококк может быть в ассоциации с другими микробами.

 

 

Лучше всего возбудитель растет на сыворотке крови лошади, в сывороточном и сахарном бульонах. На МПА растет в виде мельчайших слизистых капелек росы, но затем они становятся серо-белыми, непрозрачными. На кровяном агаре отмечают гемолиз. На МПБ (через 24 ч при 37°С) на дне колбы образуются в обильном количестве нежные, беловатые, пушистые хлопья, тогда как бульон остается прозрачным. В бульонных культурах мытного стрептококка обнаруживают гематоксин, лейкотоксин, токсин общего действия и агрессины.

 

Наиболее чувствительны к мытному стрептококку белые мыши, однако погибают и котята; кролики и морские свинки — менее чувствительны.

 

 

В навозе, соломе, сене, в волосах лошадей возбудитель сохраняется до 30 дн., на глинобитном полу — до 9 мес, в сухом гное — до года. Солнечные лучи убивают мытного стрептококка через 6—8 дн., кипячение — моментально. В растворах креолина (3%-ные), карболовой кислоты (5%-ные), сулемы (1 ; 1000) возбудитель мыта погибает за 10—15 мин.

 

Эпизоотологические данные. К заболеванию мытом предрасполагают недостаточное содержание витаминов и минеральных веществ в рационе, холодная погода, сквозняки в помещениях, большая скученность животных. Основные пути заражения — алиментарный или воздушно-капельный (контактирование больных со здоровыми, а также контаминированные возбудителем кормушки, пастбища, предметы ухода за животными и др.).

 

 

Клинические признаки. Инкубационный период — 5—18 дн., иногда сокращается до 1—2 дн. клинически мыт проявляется в типичной, абортивной и осложненной формах. Для первой характерны повышение температуры тела до 40—41°С, угнетенное состояние, потеря аппетита, катар слизистой оболочки носа, из которого сначала вытекает прозрачный, а затем слизисто-гнойный экссудат. Отмечается воспаление глотки, миндалин, подчелюстных лимфатических узлов. Последние самопроизвольно вскрываются, температура снижается, иногда раны заживают. Болезнь продолжается 15—25 дн.

 

Для абортивной формы мыта характерны нередко выраженные клинические признаки: температура тела 39—39,5°С, незначительное увеличение подчелюстных лимфатических узлов, не всегда отмечают гнойное их воспаление, регистрируют незначительное истечение слизисто-гнойного экссудата из носовой полости. Очень быстро болезнь заканчивается выздоровлением.

 

 

Для осложненной метастатической (тяжелой) формы мыта характерно образование абсцессов в околоушных, плечевых, коленных, иногда и в лимфатических узлах грудной и брюшной полостей. Отмечают также гнойное воспаление суставов. Возможны гнойный плеврит и перитонит. Течение может быть длительным и с летальным исходом.

 

Патологоанатомические изменения. Из носовых отверстий выделяется гной, подчелюстные и заглоточные лимфатические узлы увеличены, слизистая оболочка глотки гиперемирована, в бронхиальных, мезентериальных лимфатических узлах обнаруживают гнойные очаги размером с грецкий орех и больше, а в лимфатических узлах брюшной полости — величиной с голову человека. Гнойные очаги могут быть и в легких, печени, почках, в головном и спинном мозге. В грудной полости содержится несколько литров серозно-фибринозной жидкости.

 

Диагноз и дифференциальный диагноз основаны на анализе эпизоотологических, клинических и бактериологических данных. В лабораторию направляют гной из невскрывшихся абсцессов. Длинные извитые цепочки стрептококков в мазках свидетельствуют о заболевании мытом. Данную болезнь необходимо дифференцировать от сапа и гриппа лошадей, ринита и фарингита неинфекционного происхождения.

 

Иммунитет. После переболевания мытом у лошадей создается стойкий пожизненный иммунитет.

 

Профилактика и меры борьбы. При возникновении в хозяйстве мыта больных животных немедленно изолируют в теплое, светлое, хорошо вентилируемое помещение без сквозняков. В теплое время года лучше содержать больных индивидуально на открытом воздухе. При затрудненном глотании корм следует давать в виде болтушки из отрубей или муки.

 

Леч: пенициллины, окситетрациклин

Био: «Антивирус» - 20 сут. бульон. культ.

 

Микр: Грам, Ром

 

Факт пат: фибринолизин, гиалуронидаза






Дата: 2019-02-02, просмотров: 199.