Материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления пользователям Интернета и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.
© 2018 - 2024
Морфология. Холерный вибрион имеет один полярный жгутик, часто напоминает запятую (запятая Коха). Важный диагностический признак - подвижность (определяют микроскопией по методу висячей или раздавленной капли). Морфологически изменчивы. Хорошо окрашиваются водным фуксином Пффейфера и карболовым фуксином Циля.
Культуральные свойства. Факультативный анаэроб. Холерный вибрион неприхотлив к питательным средам. Хорошо размножается на 1% щелочной (рН 8,6 - 9,0) пептонной воде, опережая бактерии кишечной группы (среда обогащения), образует нежную голубоватую пленку и муть. Для подавления роста протея и некоторых других микроорганизмов используют пептонную воду с добавлением теллурита калия.
На плотных средах холерный вибрион образует гладкие стекловидные, прозрачные с голубоватым оттенком дисковидные колонии вязкой консистенции. Используют щелочной агар, желчно - солевой агар, щелочной агар с кровью, наилучшей является TCBS - агар (агар с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой).
Биохимические свойства. Холерный вибрион сбраживает с образованием кислоты без газа многие углеводы (глюкозу, сахарозу, маннозу, маннит, лактозу, левулезу, гликоген, крахмал). По отношению к трем сахарам (триада Хейберга) - сахарозе, маннозе и арабинозе вибрионы делят на восемь биохимических групп, холерный вибрион относится к первой группе (разлагает сахарозу и маннозу).
Холерный вибрион разлагает желатин, казеин, свертывает молоко и разлагает белковые препараты до индола и аммиака.
Вид V . cholerae делят на биотипы, серогруппы и серовары. Основные биотипы - классический (V . cholerae asiaticae) и Эль - Тор (V . cholerae eltor). Серогруппы выделяют по структуре О- антигенов, в основной О1 группе холерных вибрионов выделяют серовары Огава, Инаба и Хикоджима.
Антигенная структура. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- антигены и термолабильные Н- антигены. По структуре О- антигенов выделено 139 серогрупп, биотипы Эль - Тор и классический объединены в 01 группу (типируются 01 - антисывороткой). Изоляты Эль - Тор отличаются гемолитическими свойствами (вызывают гемолиз эритроцитов барана), способностью агглютинировать куриные эритроциты, резистентностью к полимиксину, по чувствительности к фагам.
О- антиген 01 группы неоднороден и включает общий А- компонент и два типоспецифических - В и С. Соответственно их наличию серовар Огава имеет сочетание АВ, Инаба - АС, Хикоджима - АВС.
Холерный вибрион может переходить из S- в R- форму, не агглютинироваться О- сывороткой. В связи с антигенной структурой для идентификации V . cholerae используют О- сыворотку, OR- сыворотку ( для выявления OR - и R - диссоциантов), типоспецифические сыворотки Инаба (С) и Огава (В). В 90 - е годы выявлен новый серовар V . cholerae 0139 (Бенгал), неагглютинирующийся вышеуказанными сыворотками, по остальным свойствам мало отличающийся от холерного вибриона 01 группы.
Не типируемые основной 01 сывороткой (т.е. не относящиеся к 01 группе) вибрионы называются неагглютинирующими (НАГ) вибрионами - холероподобными или парахолерными. Они имеют общий с холерным вибрионом Н- антиген, но отличаются по О- антигену.
По Н- антигену выделяют группы А и В, холерные вибрионы входят в группу А. Вирионы группы В (биохимически отличающиеся от холерных) имеют неоднородную структуру О- антигена и подразделяются на шесть серологических подгрупп.
Факторы патогенности холерного вибриона.
1. Подвижность (жгутики) и хемотаксис.
2. Ферменты способствуют адгезии и колонизации, взаимодействию с эпителиальными клетками - муциназа (разжижает слизь), нейраминидаза (взаимодействие с микроворсинками, создание посадочной площадки), лецитиназа и другие.
3. Эндотоксин - термостабильный липополисахарид, схожий по структуре и свойствам с другими эндотоксинами грамотрицательных бактерий.
4. Экзотоксин - холероген - главный фактор патогенности, термолабильный белок. Синтез холерогена - важнейшее, генетически детерминированное свойство холерного вибриона. Молекула холерогена состоит из двух фрагментов А и В. Собственно токсическую функцию выполняет пептид А1 фрагмента А. Молекула холерогена распознает рецептор энтероцита, проникает в мембрану клетки, активирует аденилатциклазную систему, накапливающийся циклический АМФ вызывает гиперсекрецию жидкости, Na+, HCO3-, K+, Cl- из энтероцитов. Это приводит к характерной для холеры диарее, обезвоживанию и обессоливанию организма.
5. У многих вибрионов, в т.ч. не относящихся к 01 группе, имеются различные энтеротоксины.
6. В патогенезе проявлений холеры имеет значение также фактор, повышающий проницаемость капилляров.
Некоторые особенности эпидемиологии. Холера - кишечная инфекция. Основной источник - человек (больной или вибрионоситель), загрязненная вода. Способ заражения - фекально-оральный. Индивидуальная восприимчивость к холере чрезвычайно вариабельна. Характерно большое количество скрытых (стертых) форм, вибрионосительство. Обнаружение возбудителя в воде напрямую связано с наличием больных или бактерионосителей. Холерные вибрионы 01 группы могут длительно находиться в водных экосистемах в виде некультивируемых форм.
Лабораторная диагностика. Холера относится к группе особо опасных инфекций, культивирование ее возбудителя требует соблюдения особого режима биологической безопасности. Основной метод диагностики - бактериологический, включает выделение и идентификацию возбудителя.
Материал для исследования - испражнения и рвотные массы, секционные материалы от погибших, пробы воды и смывы с объектов окружающей среды, пищевые остатки.
Для посева используют жидкие среды обогащения, щелочной МПА, элективные и дифференциально - диагностические среды (лучше TCBS). В качестве транспортной среды наиболее удобна 1% пептонная вода. Подозрительные стекловидные, прозрачные колонии пересевают для получения чистой культуры, которую идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам, подвижности, антигенным свойствам, фаготипируют.
Для ускоренной диагностики применяют иммунолюминесцентный метод, биохимическую идентификацию с набором индикаторных дисков, для обнаружения холерных вибрионов в первичных материалах - РНГА с антительным диагностикумом, для выявления некультивируемых форм - ПЦР, для определения вирулентности и синтеза холерогена - биопробы на кроликах - сосунках, ИФА, ДНК- зонды (выявление фрагмента хромосомы, несущего оперон холерогена).
Специфическая профилактика. Имеются различные вакцины - убитая из сероваров Инаба и Огава, анатоксин холерогена, химическая бивалентная вакцина. Вакцины применяют только по эпидемиологическим показаниям (низкая иммуногенность). Может проводиться антибиотикопрофилактика (превентивная терапия) тетрациклином и другими антибиотиками.
6. Задания для самостоятельной работы
Тест
ВАРИАНТ I
1. ЧУМНЫЕ БАКТЕРИИ
1) овоидные биполярно окрашивающиеся палочки
2) грамположительные палочки
3) монотрихи
4) образуют споры
5) перитрихи
Правильный ответ 1
2. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ ОТНОСИТСЯ К
1) вирусам
2) прионам
3) бактериям
4) грибам
5) актиномицетам
Правильный ответ 3
3. ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
1) Corynebacterium diphtheriae
2) Bacillus anthracis
3) Klebsiella pneumoniae
4) Bacteroides fragilis
5) Pseudomonas aeruginosa
Правильный ответ 2
4. НАИБОЛЕЕ ВИРУЛЕНТНА ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА
1) Brucella canis
2) B. suis
3) B. melitensis
4) B. neotomae
5) B. abortus
Правильный ответ 3
5. ХОЛЕРА ОТНОСИТСЯ К
1) эндемичным инфекциям
2) особо опасным инфекциям
3) инфекциям, шшне представляющим особой опасности
4) сапронозам
5) трансмиссивным инфекциям
Правильный ответ 2
6. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЧУМНЫХ БАКТЕРИЙ
1) строгий анаэроб
2) растут только в бульоне
3) оптимум Т +45°С
4) колонии напоминают «кружевной платочек»
5) требуют значительного защелачивания среды
Правильный ответ 4
7. ОСНОВНОЙ СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ТУЛЯРЕМИИ В ЭНДЕМИЧНЫХ ОЧАГАХ
1) дератизация
2) дезинсекция
3) вакцинация
4) запрет на посещение леса
5) приём антибиотиков
Правильный ответ 3
8. ОСНОВНОЙ ИСТОЧНИК ИНФЕКЦИИ ПРИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЕ
1) больной человек
2) грызуны
3) овцы и крупный рогатый скот
4) рыбы
5) бактерионоситель
Правильный ответ 3
9. С ПОМОЩЬЮ ПРОБЫ БЮРНЕ ОПРЕДЕЛЯЮТ
1) аллергическую перестройку организма
2) видовую принадлежность бруцелл
3) напряженность гуморального иммунитета
4) антигенную структуру бруцелл
5) неполные антитела
Правильный ответ 1
10. ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН
1) активно подвижен
2) образует капсулу
3) неподвижен
4) образует спору
5) не устойчив в водной среде
Правильный ответ 1
11. КОЛОНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ
1) напоминают «цветную капусту»
2) прозрачные S-формы
3) слизистые, выпуклые
4) напоминают «львиную гриву»
5) напоминают «кружевной платочек»
Правильный ответ 5
12. ПОСТИНФЕКЦИОННЫЙ ИММУНИТЕТ ПРИ ТУЛЯРЕМИИ
1) малонапряженный, непродолжительный
2) напряженный, продолжительный
3) врождённый
4) трансплацентарный
5) нестерильный
Правильный ответ 2
13. В БУЛЬОНЕ ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ РАСТЕТ В ВИДЕ
1) зернистого осадка
2) сталактитов
3) комочка ваты
4) мути
5) нежной серой пленки
Правильный ответ 3
14. БРУЦЕЛЛЫ
1) строгие аэробы
2) строгие анаэробы
3) психрофилы
4) нетребовательны к питательным средам
5) время генерации 15-20 мин.
Правильный ответ 1
15. ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ НА ХОЛЕРУ ОТ БОЛЬНОГО ЗАБИРАЮТ
1) кусочки органов
2) кровь
3) испражнения
4) ликвор
5) мочу
Правильный ответ 3
ВАРИАНТ 2
1. НАИБОЛЬШУЮ ОПАСНОСТЬ ПРЕДСТАВЛЯЮТ БОЛЬНЫЕ ЧУМОЙ ПРИ КЛИНИЧЕСКОЙ ФОРМЕ
1) бубонной
2) легочной
3) первично-септической
4) вторично-септической
5) кишечной
Правильный ответ 2
2. ЧУМА И ТУЛЯРЕМИЯ - ИНФЕКЦИИ
1) особо опасные
2) природно-очаговые
3) зоонозные
4) трансмиссивные
5) всё выше перечисленное
Правильный ответ 5
3. МОРФОЛОГИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
1) овоидные грамположительные палочки
2) мелкие грамотрицательные палочки
3) изогнутые грамотрицательные палочки
4) крупные с обрубленными концами грамположительные палочки
5) грамположительные палочки, имеющие форму веретена
Правильный ответ 4
4. ОСНОВНОЙ ФАКТОР ПАТОГЕННОСТИ БРУЦЕЛЛ
1) анатоксин
2) тейхоевая кислота
3) эндотоксин
4) пили
5) сидерофоры
Правильный ответ 3
5. ПО ГРАМУ ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН ОКРАШИВАЕТСЯ
1) грамположительно
2) грамотрицательно
3) вариабельно
4) биполярно
5) при холере метод не используют
Правильный ответ 2
6. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ
1) хорошо растет в обычных питательных средах
2) работа с возбудителем проводится в обычных баклабораториях
3) требует сложных питательных сред с яичным желтком
4) оптимум Т +20-25°С
5) растет чрезвычайно быстро
Правильный ответ 3
7. ОСНОВНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ ФОРМА ЧУМЫ В ЭНДЕМИЧНОМ ОЧАГЕ
1) кожная
2) первично-легочная
3) вторично-легочная
4) бубонная
5) септическая
Правильный ответ 4
8. НА МПА БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ РАСТУТ В ВИДЕ
1) шероховатых R-колоний с волокнистой структурой («львиная грива»)
2) слизистых колоний в S-форме
3) нежных, прозрачных, голубоватых колоний
4) черных округлых колоний с металлическим блеском
5) вообще не растут
Правильный ответ 1
9. ТИПИЧНАЯ МОРФОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛ
1) палочки
2) овоиды
3) коккобактерии
4) кокки
5) вибрионы
Правильный ответ 3
10. ДЛЯ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА ХАРАКТЕРНО
1) устойчив к желудочному соку
2) чувствителен к желчным кислотам
3) щелочелюбив
4) устойчив к высушиванию
5) неустойчив в водной среде с щелочным рН
Правильный ответ 3
11. ИДЕНТИФИКАЦИЮ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ ПРОВОДЯТ С УЧЕТОМ
1) биохимических свойств
2) антигенных свойств
3) вирулентности для лабораторных животных
4) морфо-тинкториальных свойств
5) всего вышеперечисленного
Правильный ответ 5
12. ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ ИСПОЛЬЗУЮТ
1) холодовое обогащение
2) заражение лабораторных животных
3) первичный посев в среду накопления
4) первичный посев методом секторных посевов
5) заражение культуры клеток ткани
Правильный ответ 2
13. МЕТОД ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
1) микроскопический
2) бактериологический
3) биологический
4) иммунофлюоресцентный
5) серологический
Правильный ответ 4
14. БРУЦЕЛЛЫ ИМЕЮТ
1) общий родоспецифический антиген
2) А-антиген
3) М-антиген
4) антигены, общие с антигенами возбудителей холеры, туляремии, иерсиниоза О9
5) все вышеперечисленное
Правильный ответ 5
15. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ БРУЦЕЛЛЕЗА
1) отсутствие роста при первичном посеве
2) особо медленный рост в первых генерациях
3) быстрый рост
4) рост на обычных средах
5) не культивируется in vitro
Правильный ответ 2
7. Рекомендуемая литература
Обязательная:
1. Поздеев, О. К. Медицинская микробиология: учеб. пособие / О.К. Поздеев – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 768 с.
Дополнительная:
1. Ярилин, А.А. Иммунология: учебник / А.А. Ярилин – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
2. Гиллеспи, С.Х. Наглядные инфекционные болезни и микробиология / С.Х. Гиллеспи, К.Б. Бамфорд – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 136 с.
3. Хаитов, Р.М. Иммунология: учебник / Р.М. Хаитов – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 528 с.
4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: 1 т.: учебник / ред. В.В. Зверев [и др.] – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.- 448 с.
5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: 2 т.: учебник / ред. В.В. Зверев [и др.] – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.- 480 с.
Омский государственный медицинский университет
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
УТВЕРЖДАЮ
Зав.кафедрой ___________________
Н.В. Рудаков
«____»_____________ 20____года
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Дата: 2018-12-21, просмотров: 184.