Материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления пользователям Интернета и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.
© 2018 - 2024
Лабораторная диагностика туляремии. Специфическая профилактика туляремии.
Лабораторная диагностика.
Бактериологические методы диагностики туляремии для человека имеют дополнительное значение и не всегда эффективны, что определяется биологическими особенностями возбудителя и особенностями инфекции у человека (малая концентрация возбудителя в органах и тканях).
Биопроба является намного более эффективным методом диагностики. Материал от больного (пунктат бубона, выделения с конъюнктивы, пленка с миндалин, мокрота и др.) используют для заражения лабораторных животных (чаще белых мышей), из органов павших животных делают высевы на питательные среды, культуру идентифицируют по совокупности следующих признаков:
а) морфология клеток и грамотрицательная окраска;
б) рост на желточной среде и специальных средах и отсутствие роста - на простых мясо-пептонных средах;
в) специфическое свечение в реакции иммунофлюоресценции (МФА);
г) агглютинация культуры туляремийной сывороткой;
д) способность вызывать гибель белых мышей и морских свинок с характерными патологоанатомическими изменениями в органах и выделением чистой культуры.
Бактериологические методы и биопробы могут выполняться только специализированными лабораториями, имеющими разрешение на работу с возбудителем туляремии (2 группа патогенности). В качестве метода выявления туляремийного микроба может использоваться МФА, реакция нейтрализация антител - РНАТ, в качестве дополнительного - ПЦР.
Наибольшее значение в лабораторной диагностике туляремии имеют серологические методы - РА, РПГА. Обязательно исследование парных сывороток крови. Дополнительными серологическими методами являются ИФА, РНИФ.
Аллергодиагностика (проба с тулярином - туляремийным аллергеном) чаще используется для оценки естественного и вакцинального иммунитета. ГЗТ развивается на первой неделе болезни, а также после вакцинации и сохраняется несколько лет. У больных накожные и внутрикожные туляриновые пробы не рекомендуются в связи с возможностью ухудшения состояния больного. Могут применяться методы аллергодиагностики in vitro - реакция лейкоцитолиза, РТМЛ и др.
Специфическая профилактика.
На неблагополучных по туляремии территориях применяют живую туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью пробы с тулярином. С помощью этой пробы отбирают контингенты на вакцинацию и ревакцинацию.
Возбудитель сибирской язвы.
Возбудитель сибирской язвы - Bacillus anthracis относится к роду Bacillus семейства Bacillaceae (к бациллам).
Морфология. Крупная грамположительная палочка, часто с закругленными концами. В отличие от других бацилл - неподвижна, хорошо окрашивается анилиновыми красителями. В клинических материалах расположены парами или в виде коротких цепочек, окруженных общей капсулой (образуется только в организме человека и животных или на специальных средах с кровью, сывороткой крови). На средах возбудитель образует длинные цепочки в виде “бамбуковой трости” (с утолщениями на концах и сочленениями клеток). На агаре, содержащем пенициллин, происходит разрушение клеточных стенок, образуются шаровидные протопласты в виде цепочек (“жемчужное ожерелье”). Возбудитель сибирской язвы образует эндоспоры, которые располагаются центрально, их диаметр не превышает диаметра бактериальной клетки. Споры образуются только вне организма, при наличии (доступе) кислорода и определенной температуре (от +12 до +43о С, оптимум при 30-35о С). Споры проявляют очень высокую устойчивость во внешней среде (десятилетия). Сибирская язва - прежде всего почвенная инфекция.
Культуральные свойства. Возбудитель растет в аэробных и факультативно - анаэробных условиях. Температурный оптимум +37оС, рН - 7,2 - 7,6. Растет на простых питательных средах, в т.ч. на картофеле, настое соломы, экстрактах злаковых и бобовых культур. Дает характерный рост при посеве уколом в желатин (“перевернутая елочка”). Вирулентные R- формы на плотных средах образуют шероховатые серовато - белые колонии волокнистой структуры (“голова медузы” или “львиная грива”). На жидких средах образуется осадок в виде комочка ваты. Возбудитель сибирской язвы может образовывать также гладкие (S), слизистые (М) или смешанные (SM) колонии, особенно в микроаэрофильных условиях. В S - форме возбудитель утрачивает вирулентность.
Биохимические свойства. B . anthracis биохимически высоко активна. Она ферментирует с образованием кислоты без газа глюкозу, сахарозу, мальтозу, трегалозу, образует сероводород, свертывает и пептонизирует молоко.
Антигенная структура. Выделяют три основных группы антигенов - капсульный антиген, токсин (кодируются плазмидами, при их отсутствии штаммы авирулентны), соматические антигены.
Капсульные антигены отличаются по химической структуре от К - антигенов других бактерий, полипептидной природы, образуются преимущественно в организме хозяина.
Соматические антигены - полисахариды клеточной стенки, термостабильны, долго сохраняются во внешней среде, трупах. Выявляют их в реакции термопреципитации Асколи.
Токсин включает протективный антиген (индуцирует синтез защитных антител), летальный фактор, отечный фактор.
Факторы патогенности - капсула и токсин.
Краткая эпидемиологическая характеристика. Сибирская язва - зоонозная инфекция. Основной источник для человека - травоядные животные. Их заражение происходит преимущественно алиментарным путем, споры длительно сохраняются в почве и заглатываются животными преимущественно с кормами, травой). Особую опасность представляют сибиреязвенные скотомогильники (в них споры длительно сохраняются, при их разрывании, размывании и других процессах попадают на поверхность почвы и растения). Человек заражается при контакте с инфицированным материалом (уход за больными животными, разделка и употребление в пищу инфицированных мясных продуктов, контакт со шкурами сибиреязвенных животных и др.).
Основные формы клинического проявления зависят от входных ворот инфекции - кожная (карбункул), кишечная, легочная, септическая. Характерна высокая летальность (меньше при кожной форме).
6. Лабораторная диагностика, лечение и профилактика сибирской язвы.
Лабораторная диагностика. Материал для исследования от больных зависит от клинической формы. При кожной форме исследуют содержимое пузырьков, отделяемое карбункула или язвы, при кишечной - испражнения и мочу, при легочной - мокроту, при септической - кровь. Исследованию подлежат объекты внешней среды, материал от животных, пищевые продукты.
Бактериоскопический метод используют для обнаружения грамположительных палочек, окруженных капсулой, в материалах от человека и животных, спор - из объектов внешней среды. Чаще применяют метод флюоресцирующих антител (МФА), позволяющий выявлять капсульные антигены и споры.
Основной метод - бактериологический применяется в лабораториях особо опасных инфекций по стандартной схеме с посевом на простые питательные среды (МПА, дрожжевая среда, среда ГКИ), определением подвижности, окраской по Граму и изучением биохимических особенностей. В дифференциации от других представителей рода Bacillus существенное значение имеет биологическая проба. Белые мыши погибают в пределах двух суток, морские свинки и кролики - в течение четырех суток. Определяют также лизабельность бактериофагами, чувствительность к пенициллину (жемчужное ожерелье). Для ретроспективной диагностики используют серологические тесты, аллергическая проба с антраксином, для выявления соматического антигена - реакция Асколи, которая может быть результативна при отрицательных результатах бактериологических исследований. Отличия от B . subtilis (типовой вид), B . cereus и других бацилл - неподвижность, капсулообразование при повышенном содержании CO2, патогенность для морских свинок и кроликов, чувствительность к пенициллину.
Лечение. Применяют противосибиреязвенный иммуноглобулин, антибиотики (пенициллины, тетрациклины и др.).
Профилактика. Применяют живую споровую безкапсульную вакцину СТИ, протективный антиген.
7. Иерсинии. Классификация, методы культивирования, основные свойства.
Род Yersinia включает 11 видов. Y . pestis вызывает чуму, Y . pseudotuberculesis - псевдотуберкулез, Y . enterocolitica - (кишечный) иерсиниоз, ряд видов - непатогенные или условно - патогенные для человека.
Морфология.Чаще имеют овоидную (кокко-бациллярную) форму, окрашиваются биполярно, склоны к полиморфизму. Большинство видов подвижны при температуре ниже +30 градусов Цельсия (имеют перитрихиальные жгутики), грамотрицательны, имеют капсульное вещество. Y . pestis неподвижны, имеют капсулу.
Культуральные и биохимические свойства.
Факультативные анаэробы. Температурный оптимум от +25 до + 28 градусов Цельсия, pH - близкая к нейтральной. Хорошо культивируются на простых питательных средах. Ферментируют большинство углеводов без образования газа. Иерсинии способны менять свой метаболизм в зависимости от температуры и размножаться при низких температурах (психрофильные свойства). Вирулентные штаммы образуют шероховатые (R) колонии, переходные (RS) и сероватые слизистые гладкие (S) формы.
При изучении колоний чумного микроба выделяют два типа колоний - молодые и зрелые. Молодые микроколонии с неровными краями (стадия “битого стекла”) в дальнейшем сливаются, образуя нежные плоские образования с фестончатыми краями (стадия “кружевных платочков”). Зрелые колонии крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями (“ромашки”). Многие штаммы способны восстанавливать красители с обесцвечиванием сред (метиленовый синий, индиго и др.). На скошенном агаре черед двое суток при +28о С образуют серовато - белый налет, врастающий в среду, на бульоне - нежную поверхностную пленку и хлопковидный осадок. Температура +37оС - селективная для образования капсулы у Y . pestis.
Культуры Y . pseudotuberculosis и Y . enterocolitica не имеют стадии “битого стекла”, вначале мелкие блестящие, выпуклые, затем может отмечаться сливной рост с образованием выпуклых бугристых колоний, схожих с колониями Y . pestis. Растут на универсальных питательных средах (среда Эндо, агар Мак Конки, среда Серова и др.) в сочетании с методами накопления в холодовых условиях.
Антигенная структура.
Все виды иерсиний имеют О - антиген (эндотоксин), схожий с О - антигенами других грамотрицательных бактерий и токсичный для человека и животных. Липополисахаридно- белковые комплексы О - антигенов иерсиний разделяют на S (гладкие) и R (шероховатые), последние - общие для Y . pestis и Y . pseudotuberculosis. Y . enterocolitica имеет поверхностный антиген, общий с другими энтеробактериями.
Возбудитель псевдотуберкулеза по О - и Н - антигенам подразделены на 13 сероваров, чаще встречаются серовар I, а также III и IV, иерсиниоза - на 34 серовара по О - антигену, чаще от человека выделяют серовары О3 и О9. При температуре от +22о до +25оС Y . pseudotuberculosis и Y . enterocolitica имеют жгутиковый антиген и подвижны, при +37оC теряют Н - антиген и подвижность.
Y.pestis более однородна в антигенном отношении, имея капсульный антиген (фракция I), антигены T, V - W, белки плазмокоагулазы, фибринолизина, наружной мембраны и др. Чумной микроб выделяет бактериоцины (пестицины), оказывающие бактерицидное действие на псевдотуберкулезный микроб и штаммы кишечной палочки.
Патогенные свойства.
Возбудитель чумы обладает наибольшим патогенным потенциалом среди бактерий. Он подавляет функции фагоцитарной системы, поскольку подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех классов. В патогенезе выделяют три основных стадии - лимфогенного заноса, бактеремии, генерализованной септицемии.
Возбудители псевдотуберкулеза и иерсиниоза имеют адгезины и инвазины, низкомолекулярные протеины (ингибируют бактерицидные факторы), энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности.
Клинические особенности.
Чума чаще протекает в бубонной, легочной и кишечной формах. Наиболее опасны больные легочной чумой, которые выделяют с мокротой огромное количество возбудителя.
Иерсиниоз и псевдотуберкулез - кишечные инфекции. Клиника многообразна - региональная лимфоаденопатия (имитирует аппендицит), энтероколиты, реактивные артриты, анкилозирующий спондилит, скарлатиноподобная лихорадка.
Эпидемиологические особенности.
Чума - классический природноочаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, песчанки, пищухи, в антропургических (городских) условиях - крысы (чума портовых городов). В передаче возбудителя, особенно в очагах, где преобладают незимноспящие животные, имеют блохи животных, способные нападать и заражать человека. В песчаночных очагах могут заражаться верблюды и представлять эпидемическую опасность.
Псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз в природе передаются грызунами. Иерсинии способны длительно сохраняться и даже накапливаться при низких температурах, например, в овощехранилищах. Способны вызывать заболевания у сельскохозяйственных животных. Человеку передаются преимущественно с пищевыми продуктами от животных, а также растительного происхождения.
Тест
ВАРИАНТ I
1. ЧУМНЫЕ БАКТЕРИИ
1) овоидные биполярно окрашивающиеся палочки
2) грамположительные палочки
3) монотрихи
4) образуют споры
5) перитрихи
Правильный ответ 1
2. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ ОТНОСИТСЯ К
1) вирусам
2) прионам
3) бактериям
4) грибам
5) актиномицетам
Правильный ответ 3
3. ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
1) Corynebacterium diphtheriae
2) Bacillus anthracis
3) Klebsiella pneumoniae
4) Bacteroides fragilis
5) Pseudomonas aeruginosa
Правильный ответ 2
4. НАИБОЛЕЕ ВИРУЛЕНТНА ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА
1) Brucella canis
2) B. suis
3) B. melitensis
4) B. neotomae
5) B. abortus
Правильный ответ 3
5. ХОЛЕРА ОТНОСИТСЯ К
1) эндемичным инфекциям
2) особо опасным инфекциям
3) инфекциям, шшне представляющим особой опасности
4) сапронозам
5) трансмиссивным инфекциям
Правильный ответ 2
6. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЧУМНЫХ БАКТЕРИЙ
1) строгий анаэроб
2) растут только в бульоне
3) оптимум Т +45°С
4) колонии напоминают «кружевной платочек»
5) требуют значительного защелачивания среды
Правильный ответ 4
7. ОСНОВНОЙ СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ТУЛЯРЕМИИ В ЭНДЕМИЧНЫХ ОЧАГАХ
1) дератизация
2) дезинсекция
3) вакцинация
4) запрет на посещение леса
5) приём антибиотиков
Правильный ответ 3
8. ОСНОВНОЙ ИСТОЧНИК ИНФЕКЦИИ ПРИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЕ
1) больной человек
2) грызуны
3) овцы и крупный рогатый скот
4) рыбы
5) бактерионоситель
Правильный ответ 3
9. С ПОМОЩЬЮ ПРОБЫ БЮРНЕ ОПРЕДЕЛЯЮТ
1) аллергическую перестройку организма
2) видовую принадлежность бруцелл
3) напряженность гуморального иммунитета
4) антигенную структуру бруцелл
5) неполные антитела
Правильный ответ 1
10. ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН
1) активно подвижен
2) образует капсулу
3) неподвижен
4) образует спору
5) не устойчив в водной среде
Правильный ответ 1
11. КОЛОНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ
1) напоминают «цветную капусту»
2) прозрачные S-формы
3) слизистые, выпуклые
4) напоминают «львиную гриву»
5) напоминают «кружевной платочек»
Правильный ответ 5
12. ПОСТИНФЕКЦИОННЫЙ ИММУНИТЕТ ПРИ ТУЛЯРЕМИИ
1) малонапряженный, непродолжительный
2) напряженный, продолжительный
3) врождённый
4) трансплацентарный
5) нестерильный
Правильный ответ 2
13. В БУЛЬОНЕ ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ РАСТЕТ В ВИДЕ
1) зернистого осадка
2) сталактитов
3) комочка ваты
4) мути
5) нежной серой пленки
Правильный ответ 3
14. БРУЦЕЛЛЫ
1) строгие аэробы
2) строгие анаэробы
3) психрофилы
4) нетребовательны к питательным средам
5) время генерации 15-20 мин.
Правильный ответ 1
15. ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ НА ХОЛЕРУ ОТ БОЛЬНОГО ЗАБИРАЮТ
1) кусочки органов
2) кровь
3) испражнения
4) ликвор
5) мочу
Правильный ответ 3
ВАРИАНТ 2
1. НАИБОЛЬШУЮ ОПАСНОСТЬ ПРЕДСТАВЛЯЮТ БОЛЬНЫЕ ЧУМОЙ ПРИ КЛИНИЧЕСКОЙ ФОРМЕ
1) бубонной
2) легочной
3) первично-септической
4) вторично-септической
5) кишечной
Правильный ответ 2
2. ЧУМА И ТУЛЯРЕМИЯ - ИНФЕКЦИИ
1) особо опасные
2) природно-очаговые
3) зоонозные
4) трансмиссивные
5) всё выше перечисленное
Правильный ответ 5
3. МОРФОЛОГИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
1) овоидные грамположительные палочки
2) мелкие грамотрицательные палочки
3) изогнутые грамотрицательные палочки
4) крупные с обрубленными концами грамположительные палочки
5) грамположительные палочки, имеющие форму веретена
Правильный ответ 4
4. ОСНОВНОЙ ФАКТОР ПАТОГЕННОСТИ БРУЦЕЛЛ
1) анатоксин
2) тейхоевая кислота
3) эндотоксин
4) пили
5) сидерофоры
Правильный ответ 3
5. ПО ГРАМУ ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН ОКРАШИВАЕТСЯ
1) грамположительно
2) грамотрицательно
3) вариабельно
4) биполярно
5) при холере метод не используют
Правильный ответ 2
6. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ
1) хорошо растет в обычных питательных средах
2) работа с возбудителем проводится в обычных баклабораториях
3) требует сложных питательных сред с яичным желтком
4) оптимум Т +20-25°С
5) растет чрезвычайно быстро
Правильный ответ 3
7. ОСНОВНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ ФОРМА ЧУМЫ В ЭНДЕМИЧНОМ ОЧАГЕ
1) кожная
2) первично-легочная
3) вторично-легочная
4) бубонная
5) септическая
Правильный ответ 4
8. НА МПА БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ РАСТУТ В ВИДЕ
1) шероховатых R-колоний с волокнистой структурой («львиная грива»)
2) слизистых колоний в S-форме
3) нежных, прозрачных, голубоватых колоний
4) черных округлых колоний с металлическим блеском
5) вообще не растут
Правильный ответ 1
9. ТИПИЧНАЯ МОРФОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛ
1) палочки
2) овоиды
3) коккобактерии
4) кокки
5) вибрионы
Правильный ответ 3
10. ДЛЯ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА ХАРАКТЕРНО
1) устойчив к желудочному соку
2) чувствителен к желчным кислотам
3) щелочелюбив
4) устойчив к высушиванию
5) неустойчив в водной среде с щелочным рН
Правильный ответ 3
11. ИДЕНТИФИКАЦИЮ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ ПРОВОДЯТ С УЧЕТОМ
1) биохимических свойств
2) антигенных свойств
3) вирулентности для лабораторных животных
4) морфо-тинкториальных свойств
5) всего вышеперечисленного
Правильный ответ 5
12. ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ ИСПОЛЬЗУЮТ
1) холодовое обогащение
2) заражение лабораторных животных
3) первичный посев в среду накопления
4) первичный посев методом секторных посевов
5) заражение культуры клеток ткани
Правильный ответ 2
13. МЕТОД ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
1) микроскопический
2) бактериологический
3) биологический
4) иммунофлюоресцентный
5) серологический
Правильный ответ 4
14. БРУЦЕЛЛЫ ИМЕЮТ
1) общий родоспецифический антиген
2) А-антиген
3) М-антиген
4) антигены, общие с антигенами возбудителей холеры, туляремии, иерсиниоза О9
5) все вышеперечисленное
Правильный ответ 5
15. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ БРУЦЕЛЛЕЗА
1) отсутствие роста при первичном посеве
2) особо медленный рост в первых генерациях
3) быстрый рост
4) рост на обычных средах
5) не культивируется in vitro
Правильный ответ 2
7. Рекомендуемая литература
Обязательная:
1. Поздеев, О. К. Медицинская микробиология: учеб. пособие / О.К. Поздеев – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 768 с.
Дополнительная:
1. Ярилин, А.А. Иммунология: учебник / А.А. Ярилин – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
2. Гиллеспи, С.Х. Наглядные инфекционные болезни и микробиология / С.Х. Гиллеспи, К.Б. Бамфорд – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 136 с.
3. Хаитов, Р.М. Иммунология: учебник / Р.М. Хаитов – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 528 с.
4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: 1 т.: учебник / ред. В.В. Зверев [и др.] – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.- 448 с.
5. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: 2 т.: учебник / ред. В.В. Зверев [и др.] – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.- 480 с.
Омский государственный медицинский университет
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
УТВЕРЖДАЮ
Зав.кафедрой ___________________
Н.В. Рудаков
«____»_____________ 20____года
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ
ТЕМА: Особо-опасные инфекции: лабораторная диагностика чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллёза и холеры.
дисциплина микробиология, вирусология
факультет лечебный
СОСТАВИТЕЛИ (ФИО, должность)
Краткая информация
- длительность занятия 4 часа;
- место проведения занятия учебные лабораторные кабинеты кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии;
Оснащения занятия:
1. Слайды.
2. Стенды.
3. Демонстрационные таблицы: (№ 20 Д)
4. Материалы:
v Сыворотка больного бруцеллезом – 1 пробирка на рабочее место.
v Исследуемый материал от больного животного сибирской язвой – 1 пробирка на рабочее место.
v Диагностикум бруцеллезный– 1 пробирка на рабочее место.
v Дисагностическая сыворотка к антигену возбудителя сибирской язвы – 1 пробирка на рабочее место.
v Пробирки для титрования.
v Преципитационные пробирки.
v Пипетки.
v Физиологический раствор.
v Обезжиренное квадратное стекло для постановки реакции Хеддельсона
v Антиген (диагностикум окрашенный метиленовым синим)
v Стакан с дезинфицирующим раствором для использованных пипеток
5. Демонстрационные препараты:
v Вакцина убитая бруцеллезная
v Бруцеллин.
6. Готовые реакции: РА, Райта, РНГА.
Лабораторная диагностика бруцеллёза. Специфическая профилактика бруцеллёза.
Лабораторная диагностика осуществляется с использованием бактериологических методов, биопробы, серологических реакций, аллергической пробы Бюрне, генетических методов.
Материалом для бактериологических исследований служат кровь, костный мозг, грудное молоко (у кормящих), моча, околосуставная жидкость. Чаще выделяют гемо - и миелокультуры. Чистые культуры изучают по биохимическим свойствам, определяют их способность расти на средах с добавлением бактериостатических красителей, типируют в РА.
На практике чаще используют различные серологические методы диагностики:
- развернутую реакцию агглютинации Райта - основной метод и ускоренные микрометоды на стекле - агглютинации (Хеддельсона), роз - бенгал, латекс - агглютинации;
- реакцию Кумбса - для выявления неполных антител с применением антиглобулиновой сыворотки;
- РНИФ, РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом, ИФА.
При отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований применяют аллергическую кожную пробу с бруцеллином (пробу Бюрне).
Для выделения бруцелл из объектов внешней среды и от животных широко используют биопробу, для серодиагностики у животных - РСК, для исследования молока - кольцевую пробу.
Специфическая профилактика. В очагах козье-овечьего бруцеллеза применяют живую бруцеллезную вакцину ЖБВ. Разработана химическая бруцеллезная вакцина, которая отличается от живой вакцины более низкой реактогенностью.
3. Возбудитель туляремии, его характеристика.
Представители рода Francisella входят в семейство Brucellacea.Основной вид - F . tularensis - возбудитель туляремии - природноочаговой инфекции, резервуаром которой являются многие виды преимущественно мелких диких позвоночных животных (представителей четырех основных семейств - мышевидных, заячьих, беличьих и тушканчиковых). На территории России основными носителями являются мышевидные грызуны - водяные крысы, ондатры, различные виды полевок. Помимо F . tularensis к этому роду относится F . novicida, патогенность которой для человека не доказана.
Морфология. Франциселлы - мелкие кокковидные или элипсоидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор.
Культуральные свойства. Строгие аэробы, оптимум температуры около +37 градусов Цельсия, pH - близкая к нейтральной. Культивируют на агаровых и желточных средах сложного состава с добавлением цистеина, глюкозы, крови. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, напоминающие капельки росы, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие, с голубоватым отливом.
Биохимические свойства.
Слабо ферментируют до кислоты без газа некоторые углеводы (глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу), образуют сероводород. Туляремийный микроб по вирулентности для кроликов и биохимическим особенностям, а также географическому распространению разделен на подвиды (эколого-географические расы):
- голарктическую (не ферментирует глицерин, цитруллин, маловирулентен для кроликов и человека, распространен в Евразии и Америке); туляремийный микроб этого подвида более приспособлен к водным экосистемам, способен распространяться водным путем, передаваться через комаров;
- неарктическую (ферментирует глицерин, не ферментирует цитруллин, более вирулентен для кроликов и человека, распространен в Северной Америке);
- среднеазиатскую (ферментирует глицерин и цитруллин, мало вирулентен). Среднеазиатский подвид по свойствам занимает промежуточное положение между первыми двумя, приближаясь к исходной предковой форме возбудителя.
Голарктический подвид включает три биовара - 1 (Erys - эритромицинчувствительный), 2 (Eryr - резистентный) и японский (var.japonica). Биовар 2 известен только в Евразии, где совпадает с распространением водяной крысы.
Антигенные свойства.
F.tularensis в S (вирулентной) форме имеет два основных антигенных комплекса - О антиген (обнаруживает сходство с О - антигенами бруцелл) и Vi (капсульный) антиген. Диссоциация Sà R приводит к утрате капсулы, вирулентности и иммуногенности.
Эколого-эпидемиологические особенности.
На территории России выделено 7 основных ландшафтных типов природных очагов туляремии: пойменно-болотный, луго - полевой, степной, лесной, предгорно-ручьевой, тундровый и тугайный (пойменно-пустынный) со своими основными хозяевами возбудителя и эколого-эпидемиологическими особенностями. Человек очень чувствителен к туляремийному микробу, минимальная инфицирующая доза - одна микробная клетка. Животные по чувствительности к этому микроорганизму разделены на четыре группы. Особое значение в условиях Западной Сибири имеют водяные крысы и ондатры. Заражение человека может происходить путем контакта с грызунами или инфицированными ими предметами, алиментарным путем (инфицированные грызунами вода и пищевые продукты), воздушно - пылевым путем, трансмиссивно (иксодовые клещи и другие кровососы). Н.Г.Олсуфьев выделяет две экологические формы возбудителя - “сухопутную”, характеризующуюся передачей через иксодовых клещей (все три подвида), и “водную”, связанную с околоводными видами грызунов и другими организмами - гидробионтами, с преимущественной передачей через воду и укусы комаров (голарктический подвид).
Клинико-патогенетические особенности.
Возбудитель туляремии является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность обусловлена:
- капсулой, угнетающей фагоцитоз;
- нейраминидазой, способствующей адгезии;
- эндотоксином (интоксикация);
- аллергенными свойствами клеточной стенки;
- способностью размножаться в фагоцитах и подавлять их киллерный эффект;
- наличием рецепторов к Fc- фрагменту IgG, подавлять активность систем комплемента и макрофагов.
Франциселлы проникают в организм через кожу и слизистые глаз, рта, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. Г.П.Руднев (1970) предложил в патогенезе туляремии выделить следующие стадии:
1. Внедрения и первичной адаптации возбудителя.
2. Лимфогенного заноса.
3. Первичных регионарно - очаговых (туляремийный бубон) и общих реакций.
4. Гематогенных матастазов и генерализации.
5. Вторичной полиочаговости.
6. Реактивно - аллергических изменений.
7. Обратного метаморфоза и выздоровления.
В ряде случаев процесс может ограничиваться первыми тремя фазами.
Основными клиническими формами туляремии являются язвенно-бубонная (ульцерогландулярная), глазо-бубонная (окулогландулярная), легочная, абдоминальная, генерализованная, другие формы (в т.ч. ангинозно-гландулярная), неуточненная (международная статистическая классификация болезней, 10 пересмотр. ВОЗ, 1995).
Дата: 2018-12-21, просмотров: 173.