Работа № 9. Определение дыхательного коэффициента
Поможем в ✍️ написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой

Прорастающих семян

 

Вводные пояснения. Понятие дыхание охватывает сложный комплекс окислительно-восстановительных процессов, в ходе которых преобразуется химическая природа органических соединений и освобождается энергия. Внешним, наиболее общим проявлением дыхания является поглощение кислорода и выделение углекислого газа. Этот процесс может быть выражен следующим суммарным уравнением:

C6H12O6 + 6O2 → 6CO2 + 6H2O + 2721,8 кДж

Важное доказательство химической природы дыхательного субстрата — дыхательный коэффициент (ДК), т.е. отношение объема выделенного углекислого газа (VСО2) к объему поглощенного кислорода (VO2).

ДК может служить показателем химической природы и степени окисленности субстрата, используемого при дыхании, происходящем в нормальных условиях внешней среды.

При дыхании за счет углеводов ДК= 1, например,

C6H12O6 + 6O2 → 6CO2 + 6H2O ДК=6/6=1

При окислении жиров и белков (более восстановленных соединений) кислорода поглощается больше, чем выделяется углекислого газа и ДК меньше 1(жиры — приблизительно 0,7; белки — 0,8). Например, при окисление такого типичного компонента жиров, как стеариновая кислота:

C18H36O2 + 26O2 → 18CO2 + 18H2O ДК=18/26=0,69

У прорастающих масличных семян ДК меньше 0,5, так как на этот показатель могут влиять и процессы обмена веществ, не имеющие отношения к дыханию. Например, в прорастающих семенах масличных культур часть жирных кислот идет на образование углеводов.

При окислении органических кислот (менее восстановленных, чем углеводы), таких, как яблочная, щавелевая и др., ДК больше 1. Например, при окислении яблочной кислоты:

C4H6O5 + 3O2 → 4CO2 + 3H2O ДК=4/3=1,33

Можно привести в качестве примеров следующие минимальные значения ДК во время прорастания семян (при 12-250С): кукуруза — 0,73; пшеница — 0,61; ячмень — 0,74; горох — 0,85; подсолнечник — 0,55; лен — 0,30; горчица — 0,49.

ДК может служить характеристикой условий, в которых протекает процесс дыхания (при использовании одного и того же субстрата). Значение ДК необходимо учитывать при хранении и проращивании семян.

Надо учитывать, что величина ДК может зависеть от содержания кислорода в среде: в некоторых тканях из-за затрудненного доступа кислорода наряду с аэробным происходит анаэробное дыхание, не сопровождающееся поглощением кислорода, что приводит к повышению ДК.

Величина ДК также обусловлена полнотой окисления дыхательного субстрата. Если кроме конечных продуктов в тканях накапливаются менее окисленные соединения (органические кислоты), то ДК будет меньше 1.

Данный метод не может быть использован для точных измерений объемов газов, он служит только для ориентировочного определения ДК.

Прибор для определения дыхательного коэффициента состоит из большой пробирки с плотно пригнанной каучуковой пробкой, в которую вставлена изогнутая под прямым углом измерительная трубка со шкалой из миллиметровой бумаги. Прибор необходимо установить так, чтобы трубка находилась в горизонтальном положении.

Метод, предложенный в этой работе, основан на учете изменения положения капли в капилляре, что указывает на изменение объема воздуха в приборе; если объемы обмениваемых газов при дыхании равны, то капля в трубке передвигаться не будет.

 

Материалы и оборудование. Прорастающие семена масличных культур (подсолнечник, лен, рапс), 20% раствор NaOH или KOH, раствор метиленового синего произвольной концентрации, кристаллизаторы с наклюнувшимися семенами, шпатели, коническая колба на 150 мл, хорошо пригнанная к ней резиновая пробка со стеклянной трубкой, изогнутой под прямым углом и прикрепленной к ней шкалой из миллиметровой бумаги, полоски фильтровальной бумаги, пинцет, песочные часы на 2 мин. Или секундомер, глазные пипетки с оттянутым носиком.

Ход работы:

1. Коническую колбу до половины или на 2/3 объема заполнить прорастающими семенами и плотно закрыть ее пробкой со стеклянной трубкой.

2. Ввести в конец трубки с помощью пипетки каплю раствора метиленового синего. Прибор во время опыта обязательно должен находиться при постоянной (комнатной) температуре: его нельзя держать руками, дышать на него.

3. Как только капля оторвется от края трубки, отметить на шкале положение внутреннего мениска капли, засечь время и измерить, на сколько делений шкалы продвинется капля внутрь трубки за 2-5 мин (время выбирается произвольно в зависимости от скорости движения капли). Опыт повторить дважды, найти среднее значение (данные занести в таблицу). Полученная величина (А) соответствует разнице между объемом поглощенного при дыхании семян кислорода и объемом выделеного при этом углекислого газа:

А= V(O2) - V(CO2)

Если капля не двигается, то нарушена герметичность сосуда. В этом случае необходимо плотнее закрыть пробку.

4. Затем открыть прибор, проветрить его, встряхнув семена. Прикрепить к внутренней стороне пробирки или колбы с помощью пинцета кусочек фильтровальнофй бумаги, смоченный 20% раствором щелочи, так, чтобы бумага не касалась семян и пробки.

5. Закрыть сосуд пробкой, ввести в трубку каплю красителя и произвести измерения скорости движения капли за тот же промежуток времени. Величина (Б) отражает объем поглощенного при дыхании кислорода, так как выделенный углекислый газ поглощается щелочью:

Б= V(O2)

6. Вычислить ДК:

ДК = V(CO2)/V(O2) = (Б — А)/Б

7. Результаты занести в таблицу, сделать выводы.

8. Вычислить теоретически ДК при полном окислении до CO2 и H2O следующих веществ: C18H32O2 — линолевый триглецерид, содержащийся в конопле; C2H4O2 — щавелевая кислота; C57H104O6 — триолеин; C12H22O11 — сахароза.

Схема и результаты опыта:

Культура Условия опыта Отсчет, мм за 2 мин. ДК
среднее
  без щелочи(А)        
со щелочью (Б)      
  без щелочи(А)        
со щелочью (Б)      
  без щелочи(А)        
со щелочью (Б)      

Расчеты: ДК =

Выводы:

Контрольные вопросы:

1. Что такое ДК и каковы возможности его использования для характеристики дыхания?

2. Какие свойства субстрата определяют величину ДК?

3. Какова зависимость величины ДК от внешних условий?

Записи при разборе темы

 

Дата: 2016-10-02, просмотров: 413.