Понятие о системах групп крови…

В настоящее время установлено, что каждая клетка человеческого организ­ма, в том числе и эритроцит, содержит на своей поверхности набор специфиче­ских белков - Антигенов, закрепленных генетически, которые и обеспечивают её видовую и индивидуальную специфичность. Кроме антигенов существует и второй класс белков - антитела к антиге­нам, которые циркулируют в плазме крови и при взаимодействии с определен­ным антигеном, расположенным на мембране клетки, способны вызывать реакцию агглютинации, образуя т.н. агглютинационные пары. На данный момент на поверхности эритроцита обнаружено более 300 раз­лич­­ных антигенов, ряд из которых объединен в более чем 20 систем, по которым кровь подразделяется на определенные группы (АВО, Rh-Hr, Кел-Челлано, М, N, S, Даффи, Льюис, Диего, Лютеран и т.д.).

Т.о., принадлежность человека к той или иной группе крови по различным системам обусловлена генетически, является индивидуальной особенностью и не изменяется в течение всей жизни. Наиболее важной и практически значимой является система АВО. В основу деления людей на группы крови по этой системе положено нали­чие или отсутствие на поверхности эритроцитов белков-антигенов (агглютиногенов) А и В. Антигенам А и В соответствуют антитела, обозначаемые буквами греческого алфавита а и b, названные агглютининами. Агглютиноген А и агглютинин b, агглютиноген В и агглютинин a - образуют т.н. агглютинационные пары. В норме в крови у человека таких комби­на­­­­­­ций не встречается, т.е. при отсутствии агглютиногена А в его плазме крови находится агглютинин b и наоборот. Исходя из этих положений и образуются 4 возможные комбинации антигенов и антител, т.е. система АВО включает в себя 4 группы крови:

Классификация по системе АВО:

1. I (0) группа - в эритроцитах не содержатся агглютиногены А и В, в плазме крови имеются агглютинины альфа и бетта.

2. II (A) группа - в эритроцитах у людей с этой группой крови имеется агглютиноген А, а в плазме крови - агглютинин бетта.

3. III (B) группа - в эритроцитах у людей с этой группой крови имеется агглютиноген В, а в плазме крови - агглютинин альфа.

 4. IV (АВ) группа - у людей в этой группой крови в эритроцитах имеются агглютиногены А и В, при этом в плазме крови агглютинины отсутствуют.

Агглютиногены А и В неоднородны по своей структуре, т.е. можно выделить подгрупповые факторы, например А1, А2........, В1, В2......., и т.д.

Система резус (Rh-Hr)

Впоследствии оказалось, что и у 85% людей в эритроцитах содержится белок, названный резус-фактором (Rh-фактор). Людей, на эритроцитах которых есть Rh-фактор, называют резус-положительными, а у которых он отсутствует - резус-отрицательными. Наследуется Rh-фактор как доминантный признак, т.е. будет проявляться фенотипически и в гетерозиготном состоянии. В настоящее время установлено, что Резус-фактор наследуется с помощью 3-х антигенов: C, D и Е, однако из них только на D-антиген вырабатываются антитела. Таким образом, резус-положительными называются люди, имеющие на поверхности своих эритроцитов D-антиген. Существуют отдельные народы (н-р: эвены) со 100% Резус-положительным населением. Среди европеоидов 85% резус-положительных Особенностью данной системы и отличием от системы АВО является то, что против Rh-фактора нет врожденных антител, однако они могут быть выработаны в следующих ситуациях:

1. Если Rh-положительную кровь перелить Rh-отрицательному пациенту.

2. При беременности Rh-отрицательной женщины Rh-положительным плодом. Для иммунизации достаточно 0,25 мл Rh(+) крови. Rh-антитела, в отличие от агглютининов  и , являются не полными, следовательно, их молекулярный вес позволяет им проникать через плацентарный барьер из материнского крово­­тока в кровоток плода, что, при достаточной концентрации антител может привести к развитию резус-конфликта. Резус-конфликт может развиться:

1. При повторном переливании Rh-положительной крови Rh-отрицательному пациенту (очень редкая ситуация, страдает реципиент).

2. При повторной беременности Rh-отрицательной женщины Rh-положительным плодом. Эту ситуацию называют резус-конфликтом матери и плода (встречается гораздо чаще, страдает плод: варианты - от гемолитической желтухи новорожденных до внутриутробной гибели плода). В настоящее время, чтобы избежать Резус-конфликта, таким матерям из группы риска при абортах и родах вводят концентрированные анти-D-антитела, которые агглютинируют Rh(+) эритроциты плода в кровотоке матери и не дают её организму выработать собственные анти-D-антитела.

Правила переливания крови:

Если можно не переливать, то не переливать ! (т.е. по возможности переливать не цельную кровь, а кровезаменители либо отдельные фракции или компоненты крови, в зависимости от конкретных показаний).

1. Определение групп крови донора и реципиента по системе АВО. Методы определения групп крови:      

а. Определение групп крови по стандартным сывороткам.   

б. Определение групп крови по стандартным эритроцитам.    

в. Перекрестный метод (и по стандартным сывороткам, и по эритроцитам).  

г. Определение групп крови по моноклональным антителам (к антигенам по системе АВО).

2. Определение резус-принадлежности.

3. Проведение пробы на индивидуальную совместимость (смешивают по одной капле кровь донора и реципиента) - контроль совместимости по другим системам крови (нельзя постоянно переливать кровь от одного донора - м.б. иммунизация по другим системам крови).

4. Проведение пробы на биологическую совместимость (переливают по 10-15 мл крови и выжидают 20 минут, затем повторяют процедуру, т.к. возможно появление клиники гемотрансфузионного шока).

 Клиника гемотрансфузионного шока:

1. Реакция агглютинации - агглютинаты блокируют зону микроциркуляции - ишемия тканей - боли в пояснице, одышка, акроцианоз, рефлекторный кашель.

2. Гемолиз - значительное повышение вязкости крови, выход тканевых тромбопластинов (обломки мембран эритроцитов).

 3. ДВС-синдром. Для того, чтобы произошла агглютинация, необходимы следующие условия:

1. Наличие агглютинационной пары.

 2. Достаточная концентрация агглютининов. Так, если небольшое количество крови I группы (до 500 мл) ввести в кровеносное русло человеку со II группой, то произойдет разведение агглютининов, они станут неактивными и реакция агглютинации не произойдет. В настоящее время в плановом порядке переливается только одногруппная кровь! Однако, в полевых условиях, при экстремальных ситуациях необходимо помнить о втором условии агглютинации. Это позволяет однократно, в объеме до 500 мл использовать для переливания кровь I группы в качестве универсаль­ной по жизненным показаниям (см. схему совместимости групп крови) . Таким образом, люди с I группой крови являются "универсальными донорами", а с IV - "универсальными реципиентами". Методы переливания крови:

1. Прямое (по экстренным показаниям, через шприц с тройником и зажимом).

2. Струйное (по экстренным показаниям, донорская стабилизированная кровь).

3. Капельное (по плановым показаниям, донорская стабилизированная кровь).

15. Методы определения групп крови.

Простая реакция

Принадлежность группы крови проводится при комнатной температуре: +15..25°C. На маркированной тарелке белого цвета записывается фамилия лица, у которого производится определение. Затем на эту же тарелку наносится по 2 капли стандартных сывороток (каждая сыворотка наносится своей пипеткой) групп Oαβ(I), Aβ(II), Bα(III) двух серий (расстояние между каплями не менее 5 см).

Справа от капель сывороток помещаются капля исследуемой крови, которая должна быть в 5-10 раз меньше капель сывороток.

Кровь перемешивают с сыворотками. Делают это стеклянной палочкой или одним и тем же углом предметного стекла. После каждого перемешивания палочка (стекло) промывается в воде и вытирается насухо.                  

За ходом реакции наблюдают в течение 5 минут, периодически покачивая тарелку.

В те капли, где к 3-й минуте наблюдения произошла агглютинация, вводят по 1 капле физраствора (чтобы дифференцировать псевдоагглютинацию), после чего еще наблюдают 2 минуты.

Результат оценивается по наличию агглютинации по истечении 5 минут наблюдения:

o кровь Oαβ(I) группы - со стандартными сыворотками агглютинации не наступило;

o кровь Aβ(II) группы - агглютинация наступила с сывороткой Oαβ(I) и Bα(III), и не наступила с сывороткой Aβ(II);

o кровь Bα(III) группы - агглютинация наступила с сывороткой Oαβ(I) и Aβ(II), и не наступила с сывороткой Bα(III);

o наличие агглютинации со всеми стандартными сыворотками еще не позволяет отнести кровь к ABO(IV) группе, т.к. возможна панагглютинация. В таком случае на тарелку наносится 2 капли стандартной сыворотки ABO(IV) группы и добавляется к ним капля исследуемой крови - если через 5 минут агглютинации не произошло, то кровь относят к ABO(IV) группе.

Двойная реакция

Кровь для исследования берется и вены в объеме 5 мл в чистую сухую пробирку без добавления цитрата, чтобы можно было получить отдельно сыворотку и эритроциты.

Кроме стандартных сывороток берутся стандартные эритроциты групп, которые готовятся в специальных учреждениях службы крови.

Тарелка делится на две части горизонтальной линией. В верхней части ведется исследование стандартными сыворотками с исследуемыми эритроцитами; в нижней части - стандартными эритроцитами с исследуемой сывороткой.

По истечении 5 минут производится оценка и делается заключение о группе крови.

Определение групп крови моноклинальными антителами

Моноклинальные антитела (ABO-титрующие: цоликлоны анти-А и анти-В) получаются при помощи генной инженерии. Их готовят в промышленных масштабах из крови стерильных мышей, поэтому исключается заражение гепатитом или СПИДом. Цоликлон анти-А окрашивается в голубой цвет; анти-В - в розовый.

Цоликлоны наносятся на планшет одной большой каплей (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А, анти-В. Рядом наносится по одной маленькой (0,01 мл) капле исследуемой крови. После смешивания реагентов и крови реакцию агглютинации наблюдают в течение 2,5 минут.

Оценка результатов:

o кровь Oαβ(I) группы - агглютинации нет ни с цоликлоном анти-A, ни с анти-B (эритроциты не содержат антигенов A и В);

o кровь Aβ(II) группы - агглютинация произошла только с цоликлоном анти-A (эритроциты содержат только антиген A);

o кровь Bα(III) группы - агглютинация произошла только с цоликлоном анти-B (эритроциты содержат только антиген B);

o кровь ABO(IV) - агглютинация наблюдается с обеими цоликлонами (эритроциты содержат оба антигена). В этом случае производится контрольное исследование дабы исключить аутоагглютинацию. Одна капля (0,1 мл) изотонического раствора хлорида натрия смешивается с каплей (0,01 мл) исследуемой крови - реакция агглютинации должна отсутствовать.