Материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления пользователям Интернета и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.
© 2018 - 2024
Согласно МУ 3.1.2.3047-13 «Эпидемиологический надзор за внебольничными пневмониями» лабораторные исследования по этиологической расшифровке спорадической заболеваемости ВП осуществляют в лабораториях медицинских организаций (МО) в соответствии с действующими нормативными методическими документами. При эпидемиологическом расследовании случаев заболевания в зарегистрированном эпидемическом очаге ВП исследования материала от больных проводят в лаборатории МО и в организации, обеспечивающей государственный санитарно-эпидемиологический надзор.
Условием качественного проведения лабораторной диагностики является соблюдение пераналитического, аналитического и постаналитического этапов.
Преаналитический этап
Отбор материала для лабораторного исследования от больного проводит специалист МО. Сбор биологического материала осуществляют в день обращения пациента за медицинской помощью до начала этиотропного лечения. Лица, ответственные за сбор, хранение и транспортировку образцов биологических материалов должны владеть навыками безопасной работы с биологическим материалом.
Правила получения биологического материала
При подозрении на ВП пневмококковой этиологии исследуют материал дыхательных путей (мокрота и ее индуцированный вариант, трахеальный аспират, пробы в ходе бронхоскопии), плевральную жидкость, венозную кровь, ликвор, мочу, материал, полученный при аутопсии. При недоступности материала из дыхательных путей для ряда методов допускается проведение исследования мазков из ротоглотки и носоглотки.
У госпитализированных пациентов отбор материала проводят при поступлении (не позднее вторых суток) и до назначения антибиотиков. При невозможности выполнения указанного требования материал забирают перед введением очередной дозы антимикробного препарата.
Мокрота
- для микроскопического и бактериологического исследования
Сбор свободно отделяемой мокроты осуществляют натощак или не ранее двух часов после еды. Предварительно пациента просят почистить зубы и тщательно прополоскать рот кипяченой водой.
Больной делает несколько глубоких вдохов с задержкой дыхания на несколько секунд, затем с силой производит выдох, что способствует появлению продуктивного кашля и отделению мокроты. Пациента откашливает мокроту (не слюну!) в стерильный контейнер. Объем образца должен составить не менее 3 мл для взрослых (около 1 мл для детей).
Хранение образца:
В стерильной емкости
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 2 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- для исследования методом ПЦР в количественном формате.
Используются только наборы реагентов, в инструкции которых указан этот тип клинического материала. Сбор мокроты аналогичен предыдущему пункту.
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 6 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- при температуре морозильной камеры - 16 - 20º С – до 1 мес.
И ндуцированная мокрота
- для микроскопического и бактериологического исследования
Перед процедурой взятия материала пациент получает сальбутамол через дозирующий ингалятор для предотвращения бронхоспазма. Затем в течение 15 минут через струйный небулайзер (аэрозольный аппарат) подается кислород со скоростью 5 л /мин с 5 мл 5% стерильного раствора NaCl. После этого проводится постукивание по передней и задней стенкам грудной клетки с целью стимуляции отхождения мокроты. Пациента просят откашлять мокроту (не слюну!) в стерильный контейнер. Объем образца должен быть не менее 3 мл для взрослых (около 1 мл для детей).
В случае если мокрота не откашливается, процедуру рекомендуют комбинировать с последующим получением аспирата из трахеи.
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 2 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- для исследования методом ПЦР в количественном формате.
Используются только наборы реагентов, в инструкции которых указан этот тип клинического материала. Сбор мокроты аналогичен предыдушему пункту.
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 6 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- при температуре морозильной камеры - 16 - 20º С – до 1 мес.
Мазки со слизистой оболочки верхних дыхательных путей
Бактериоскопия мазков с задней стенки глотки не проводится в связи с недостаточной информативностью результата.
Бактериологический посев мазков с задней стенки глотки осуществляется лишь при невозможности получения свободно отделяемой и индуцированной мокроты (детский возраст, дебют пневмонии).
- для бактериологического исследования
Мазки берут в специальную транспортную систему типа Амиеса (Copan®) сухим стерильным зондом из полистирола с вискозным тампоном (специальной щеткой) вращательными движениями с задней стенки глотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем.
После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой. При использовании коммерческих тампонов фирмы Copan® после погружения в питательную среду конец зонда с тампоном (1 см) отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку.
Хранение образца:
В коммерческой транспортной среде (типа Амиеса, Copan®) при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 48 ч. (не допускается хранение в условиях холодильника и термостата).
- для исследование методом ПЦР в количественном формате
Осуществляют при невозможности получения свободно отделяемой и индуцированной мокроты (детский возраст, дебют пневмонии). Используют только наборы реагентов, в инструкции которых указан этот тип клинического материала.
Материал берут после полоскания полости рта кипяченой водой комнатной температуры. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется ее удалить. В течение 6-ти часов перед процедурой нельзя использовать медикаменты, орошающие носоглотку или ротоглотку и препараты для рассасывания во рту.
Мазки у пациента берут двумя разными зондами сначала со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки, при этом концы зондов с тампонами после взятия мазков последовательно помещают в одну пробирку объемом 1,5-2 мл с 0,5 мл транспортной среды для респираторных мазков.
Мазки со слизистой носоглотки у детей берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе, у взрослых - сухим стерильным зондом из полистирола с вискозным тампоном. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2–3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3–4 см для детей и 5–6 см для взрослых). После забора материала конец зонда с тампоном опускают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой до места слома, при этом гибкая часть зонда сворачивается спиралью, далее, прикрывая сверху пробирку крышкой, рукоятку зонда опускают вниз, добиваясь полного отламывания верхней части зонда. Пробирку герметично закрывают.
Мазки из ротоглотки берут сухим стерильным зондом из полистирола с вискозным тампоном вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой и зондом с мазком из носоглотки. Конец зонда с тампоном (1 см) отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку.
Хранение образца:
В коммерческой транспортной среде (типа «Транспортная среда для хранения и транспортировки респираторных мазков», ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора)
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 6 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 72 ч.;
- при температуре морозильной камеры - 16 - 20º С – до 1 мес.
Т рахеальный аспират
- для микроскопического и бактериологического исследования
Манипуляцию проводят натощак после чистки зубов и полоскания полости рта водой. Пациента просят сделать несколько глубоких вдохов с задержкой дыхания на несколько секунд, затем с силой выдохнуть. Это способствует появлению продуктивного кашля и очищению верхних дыхательных путей от мокроты. После присоединения мукус-экстрактора через трубку-переходник к отсосу катетер для забора трахеального аспирата вводится в глотку через полость рта. Вследствие раздражения слизистой в области голосовой щели провоцируется кашлевой рефлекс и проводится извлечение трахеального содержимого через стерильный катетер (6 или 7 размера) с помощью отсоса. Материал переносят в стерильную емкость (контейнер).
Объем трахеального аспирата должен составлять не менее 3-5 мл для взрослых (около 1мл для детей).
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 2 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- для исследования методом ПЦР
Сбор материала аналогичен предыдущему пункту.
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 6 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- при температуре морозильной камеры - 16 - 20º С – до 1 мес.
Плевральная жидкость
- для микроскопического и бактериологического исследования
Перед проведением чрескожной аспирации тщательно очищают выбранный участок кожи 70% раствором этилового спирта; затем дезинфицируют его 1-2% раствором йода или другим дезинфицирующим средством (разрешенным к применению для этих целей в установленном порядке) для предотвращения контаминации; избыток йода удаляют марлевой салфеткой, смоченной 70%-м спиртом, во избежание ожога кожи пациента.
Соблюдая правила асептики, выполняют чрескожную аспирацию для получения пробы плевральной жидкости. Удаляют пузырьки воздуха из шприца и немедленно переносят пробу в стерильную емкость и (или) транспортные системы со специальными средами коммерческого (типа SIGNAL для «посева крови») или местного (тиогликолевая среда) производства.
Отправлять пробу в шприце с удаленной иглой, закрытой стерильной резиновой пробкой в лабораторию не рекомендуется из-за вероятности прокола сотрудником кожных покровов (при проведении манипуляции), а также из-за образования плотного сгустка в результате присутствия в плевральной жидкости большого количества белковых компонентов.
Рекомендуемый объем плевральной жидкости, который необходимо направить в лабораторию составляет 10-15 мл.
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 2 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
*В коммерческой транспортной среде «для посева крови» (тип Oxoid, BD, Hi-Media и пр.):
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 24 ч.;
- при температуре термостатирования + 35 + 37º С – до 48 ч.;
*В транспортных питательных средах, приготовленных в лаборатории (тиогликолевая среда):
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 24 ч.;
- при температуре термостатирования + 35 + 37º С – до 48 ч.
* - Посев биологического материала в указанные питательные среды позволяет оценить выросшие колонии без учета их количества в исследуемом образце.
- для исследования методом ПЦР
Сбор материала аналогичен предыдущему пункту. Плевральную жидкость помещают в стерильный контейнер.
Хранение образца:
В стерильной емкости:
- при комнатной температуре + 20 + 25º С – до 6 ч.;
- при температуре холодильной камеры + 2 + 8º С – до 24 ч.;
- при температуре морозильной камеры - 16 - 20º С – до 1 мес..
Дата: 2018-12-28, просмотров: 218.